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免疫荧光微球的问题?
huarenqiang5
建议做一下电镜或者用粒度仪测一下粒径,到底聚集到什么程度,如果是聚集的验证,那就要在偶联的方案上做改变,比方说EDC的用量,微球的用量,偶联的过程、缓冲体系等,缓冲体系一般用MES和硼酸体系,都可以试下,另外,你跑条时的表面活性剂也要摸索下,这个很关键。还有就是你如果只是药物筛选,完全可以把荧光标记物液态保存,不必喷到样品垫上去,这样也有利于释放。
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检测疫苗免疫效果时,有淋巴细胞分型实验,这个一定要用流式检测吗,看到网上有elisa试剂盒,可以选择吗?
huarenqiang5
检测疫苗免疫效果时,淋巴细胞分型实验,可以用elisa试剂盒。
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检测疫苗的免疫效果一般选择哪些指标?
毛利小五郎的徒弟
可以检测抗体产生速率及有效期。
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免疫印迹实验所有条带连成片
dxy_5kz0zll2
原因最可能是样品量上的太多,其次是电泳长时间停止样品弥散。
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FITC-CM-Dextran 怎么配
huarenqiang5
7.6gNaHCO3,1.06gNa2CO3,7.36gNaCl,加水定容至1L。将FITC溶于DMSO中,浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。
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大分子量蛋白200kDa,在做western blot要注意什么
loveliufudan
在进行 Western blot 实验时,对于大分子量蛋白(如200 kDa)的检测需要特别注意以下几点:蛋白质的迁移:由于大分子量蛋白分子较大,迁移速度较慢。为了充分迁移,需要增加电泳时间、电压或使用缓冲液含有特殊的离子浓度梯度。蛋白质的转移:大分子量蛋白转移至膜上的效率可能较低,因此需要更长的转移时间和更高的电流来促进转移。膜的选择:选择适合大分子量蛋白检测的膜。例如,PVDF(聚偏氟乙烯)膜
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大分子量蛋白转移效率低的解决方法
loveliufudan
以下是一些可以尝试的方法来提高大分子量蛋白的转移效率:增加电流:使用更高的电流可以加快蛋白质的转移速度。一般情况下,使用200 mA或更高的电流可以提高转移效率。延长转移时间:由于大分子量蛋白的迁移速度较慢,需要更长的转移时间来完成转移。一般来说,大分子量蛋白的转移时间需要至少1小时或更长时间。使用缓冲液含有特殊的离子浓度梯度:一些缓冲液(如Tris-Glycine)中含有特殊的离子浓度梯度,可以
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条带立即出现肉眼可见的黄色,但是显影仪器上怎么也拍不出来条带
loveliufudan
如果在显影仪器上无法拍出实验显影内参条带,可能有以下几个原因:显影时间不够长:有时候,即使条带已经显现,但显影时间仍然不够长,导致显影强度不足,无法被显影仪器检测到。建议在检测之前将显影时间适当延长,以确保显影强度充足。显影条件不合适:不同的内参条带可能需要不同的显影条件(例如显影时间、底物浓度等),如果显影条件不合适,则可能无法被显影仪器检测到。建议根据实验要求,对显影条件进行优化和调整。显影仪
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免疫荧光是不是必须要有空白对照、阴性对照和同型对照,如果少了一个是不是要再做一次啊?
毛利小五郎的徒弟
不可以只设一种,你提到的都需要对照,缺乏对照的话统计学上误差增加
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免疫荧光实验中,目标蛋白荧光很弱怎么办
loveliufudan
如果在免疫荧光实验中,目标蛋白的荧光很弱,可能有以下几个原因:次生抗体或探针浓度不够:次生抗体或探针是检测目标蛋白的关键试剂,如果浓度不够,可能无法充分与目标蛋白结合,导致荧光信号很弱。建议适当调整试剂的浓度,以确保充分结合和信号强度。特异性抗体质量不佳:特异性抗体质量不佳可能导致与非目标蛋白的结合,或者结合不充分,从而导致荧光信号很弱。建议更换高质量的特异性抗体,或者优化抗体结合条件,以提高信号
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急急急!Taqman Pcr为什么会出现这种结果?
sswei
通道数量少,基线水平高,报告难以出。
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有淋巴细胞做抗原实验
huarenqiang5
免疫同一只小鼠建议用同一品类的血液提取的淋巴细胞。免疫小鼠1.0×10-2.5×10 个脾细胞。
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杂交瘤细胞什么时候进行传代?
huarenqiang5
当细胞处于对数生长的中期时,可按1:3~1:10的比例传代。每3~5天传代一次。
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激光共聚焦显微镜与荧光显微镜显示的染色结果为何不同?
huarenqiang5
1、荧光显微镜:荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。2、激光共聚焦显微镜:激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究,并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段,结合其他相关生物技术,在形态学、生理学、免疫学、遗传学等分子细胞生物学领
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想知道免疫酶染色中的 3% 过氧化氢及 2N 盐酸是否还需要用?
loveliufudan
在免疫荧光实验中,过氧化氢和盐酸通常用于免疫酶染色的显色步骤。过氧化氢用于去除样本中的内源性过氧化氢,以避免假阳性结果。2N 盐酸则用于裂解细胞膜和细胞核,以释放酶底物和染色质,并使细胞内的目标抗原易于识别。但是,在进行免疫荧光实验时,由于您使用的是二抗 FITC 标记,而不是酶标记,因此不需要使用过氧化氢和盐酸进行显色步骤。因此,您可以不使用 3% 过氧化氢和 2N 盐酸。需要注意的是,即使您不
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非特异性免疫荧光染色
balalaLy
可以适当延长封闭时间或者提高封闭液的血清浓度
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细胞片组织片固定的原理
天一湖医者
固定方法可以分为两类:有机溶剂和交联剂。有机溶剂如甲醇和丙酮等可去除类脂并使细胞脱水,同时将细胞结构蛋白沉淀。交联剂如多聚甲醛通常通过自由氨基酸基团形成分子间桥连,从而产生一种抗原相互连接的网络结构。交联剂比有机溶剂更易于保持细胞的结构,但因为交联阻碍抗体结合,可能会降低一些细胞组分的抗原性,因此需要增加一个通透步骤以使抗体能够进入标本。两种固定方法都可能使蛋白抗原变性,因此使用变性蛋白作为抗原生
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免疫荧光实验通透剂的选择及原理
天一湖医者
一般用 0.1%皂角苷戒 0.02%的Triton X-100 进行通透。
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细胞免疫荧光实验抗原占位
毛利小五郎的徒弟
一般不存在,抗原占位多数可以通过提高抗体的特异性来避免
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细胞转染了带FLAG的质粒为什么看不到荧光?
天一湖医者
和你表达的蛋白有关系.如果转染后24h没有达到蛋白表达的峰值,或者呈比较低的表达量的话,做IF时可能会信号很低,有的甚至可能观察不到信号.
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