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原因最可能是样品量上的太多,其次是电泳长时间停止样品弥散。
sswei
多数原因是上样量过多,其次是样品弥散或中途停止了电泳。
loveliufudan
如果所有的条带都连成了一片,通常说明你的免疫印迹实验存在严重的非特异性结合或者污染。这种情况可能是由于以下原因引起的:
阻塞不足:在进行免疫印迹实验时,你需要先将膜或者板子中未被结合的位点进行阻塞,避免后续的抗体在这些位点上非特异性结合。如果阻塞不足,可能会导致非特异性结合现象。
第一抗体浓度过高:如果第一抗体的浓度过高,可能会导致其在非特异性位点上结合,而不仅仅是特异性的目标蛋白。
第二抗体浓度过高:如果第二抗体的浓度过高,可能会导致其在非特异性位点上结合,同样会出现非特异性结合现象。
样品污染:在进行免疫印迹实验前,需要将实验器具和试剂进行彻底清洗,避免样品污染。如果样品中存在其他蛋白质或者化合物,可能会干扰免疫印迹实验的结果。
因此,要避免所有条带连成片的情况,需要严格控制实验条件,特别是阻塞和抗体浓度的选择。此外,实验前需要仔细清洗实验器具和试剂,保证样品的纯度和质量。
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