材料与仪器
蛋白质
转移缓冲液
半干燥转移装置 滤纸
转移缓冲液
半干燥转移装置 滤纸
步骤
1. 制备样品，并在小型或标准尺寸的单向或双向凝胶上分离蛋白质。
2. 准备转印膜
3. 拆卸凝胶夹层，除去积层胶。
4. 组装转印夹层：
3. 拆卸凝胶夹层，除去积层胶。
4. 组装转印夹层：
Mylar聚酯薄膜屏蔽物
3张以转移缓冲液饱和的滤纸
已平衡的转印膜
凝胶
3张以转移缓冲液饱和的滤纸
已平衡的转印膜
凝胶
3张以转移缓冲液饱和的滤纸
当每一组分往上堆叠时，需排除气泡。
5. 在转移夹层的顶部放置顶电极。
5. 在转移夹层的顶部放置顶电极。
6. 小心将高压导线和电源相连。在恒流下转移蛋白。通常只需转移1 h。
7. 转移后，关闭电源，拆卸转移装置，取出膜，标记好凝胶方向。进行染色和免疫检测。
图一、利用半干转移系统中进行免疫印迹
来源：丁香实验
