免疫荧光微球的问题？

建议做一下电镜或者用粒度仪测一下粒径，到底聚集到什么程度，如果是聚集的验证，那就要在偶联的方案上做改变，比方说EDC的用量，微球的用量，偶联的过程、缓冲体系等，缓冲体系一般用MES和硼酸体系，都可以试下，另外，你跑条时的表面活性剂也要摸索下，这个很关键。还有就是你如果只是药物筛选，完全可以把荧光标记物液态保存，不必喷到样品垫上去，这样也有利于释放。

喷的过程中样品可能有流失，而且会影响微球的接触面积，所以容易失败

这个问题可能是由于以下原因引起的：

清洗问题：如果未能充分清洗结合垫，残留的阻滞剂或清洗液可能会影响荧光微球与结合垫的结合。

结合垫的pH值问题：荧光微球与结合垫的结合通常需要一定的pH值范围，因此需要确保结合垫的pH值适当，不会影响荧光微球与结合垫的结合。

喷涂均匀性问题：如果喷涂荧光微球的均匀性不好，可能会导致微球固定在一些地方，而在其他地方没有固定。这可能会导致结合垫上微球的分布不均匀，从而影响显色效果。

其他问题：例如微球的光学特性和抗体的选择等可能也会影响显色效果。

为了解决这个问题，您可以尝试以下几点：

确保结合垫清洗充分，去除阻滞剂或残留的清洗液。

确保结合垫的pH值适当。

确保喷涂荧光微球的均匀性。

尝试使用不同的荧光微球或抗体。

尝试不同的温度和时间进行烘干。

最后，建议您对每个实验步骤进行优化，并进行对照实验，以确定问题的根源和最佳实验条件。