大分子量蛋白转移效率低的解决方法

以下是一些可以尝试的方法来提高大分子量蛋白的转移效率：

增加电流：使用更高的电流可以加快蛋白质的转移速度。一般情况下，使用200 mA或更高的电流可以提高转移效率。

延长转移时间：由于大分子量蛋白的迁移速度较慢，需要更长的转移时间来完成转移。一般来说，大分子量蛋白的转移时间需要至少1小时或更长时间。

使用缓冲液含有特殊的离子浓度梯度：一些缓冲液（如Tris-Glycine）中含有特殊的离子浓度梯度，可以促进大分子量蛋白的转移。可以尝试使用这些缓冲液来提高转移效率。

选择合适的膜：PVDF（聚偏氟乙烯）膜比NC（硝酸纤维素）膜更适合检测大分子量蛋白，因为PVDF膜具有更好的耐久性和更高的吸附容量，可以增加大分子量蛋白的转移效率。

优化电泳条件：优化电泳条件可以提高大分子量蛋白的转移效率。可以尝试使用更低的凝胶浓度、增加电场强度、延长电泳时间等方法。

需要注意的是，以上方法可能需要根据具体情况进行适当的调整和优化，以达到最佳效果。同时，为了避免蛋白质降解或损失，建议在转移之前进行质量控制，如确定蛋白质的浓度和纯度，以及避免使用过期的试剂和材料。

转移缓冲液中加入终浓度0.1%SDS也可以增加转移效率；或者使用优质的转移膜或使用小孔径的NC膜（0.2微米）。

分离胶浓度不能太高尽量用10%以下的，Western转膜液的甲醇含量可以适当减少一点，促进蛋白从胶中分离