细胞片组织片固定的原理

固定方法可以分为两类:有机溶剂和交联剂。有机溶剂如甲醇和丙酮等可去除类脂并使细胞脱水,同时将细胞结构蛋白沉淀。交联剂如多聚甲醛通常通过自由氨基酸基团形成分子间桥连,从而产生一种抗原相互连接的网络结构。交联剂比有机溶剂更易于保持细胞的结构,但因为交联阻碍抗体结合,可能会降低一些细胞组分的抗原性,因此需要增加一个通透步骤以使抗体能够进入标本。两种固定方法都可能使蛋白抗原变性,因此使用变性蛋白作为抗原生产的抗体在免疫荧光中可能更为有效。

多聚甲醛、丙酮、甲醇和乙醇都是常用的细胞片和组织片的固定剂。它们的固定原理主要是通过交联蛋白质、DNA、RNA等分子，使它们不再发生生物学反应和分解，从而保留细胞或组织在固定后的形态和结构。

其中，多聚甲醛是最常用的细胞和组织固定剂之一。多聚甲醛可以和细胞中的蛋白质和核酸发生交联反应，形成固定的网状结构，从而保持细胞和组织的形态和结构。此外，多聚甲醛还具有优良的组织渗透性，能够更好地保留组织的细胞结构和细胞间连接。

丙酮、甲醇和乙醇主要是用于对细胞或组织进行快速固定，可以在较短的时间内形成交联作用，从而更好地保留细胞或组织的形态和结构。这些固定剂的交联机制与多聚甲醛类似，主要是通过和蛋白质和核酸发生交联反应，形成固定的网状结构。

需要注意的是，固定剂的选择应该根据实验需要和所研究的生物样本的特点来确定。不同的固定剂有不同的适用范围和特点，例如某些固定剂可能会对某些蛋白质和核酸产生影响，影响实验结果的准确性。因此，在选择固定剂时需要根据具体实验要求进行合理选择，并进行优化。

固定的原埋是利用物理或化学的方法，使组织尽可能保存接近生命状态的结构，固定细胞内的各种成分，避免死后自身酶分解出现自溶，或外界微生物侵入繁殖导致细胞的超微结构受到破坏。