毛利小五郎的徒弟
一般70-80摄氏度是最好的,不建议太高温度
huarenqiang5
可以在温箱内多烤些时间,一般60度过夜;如果还是不好也可以在烤片机上烤一两个小时。而烤片机的温度通常是78度。你可以根据自己的情况作一下调整,但延长烤片时间是解决脱片的一个不错的办法。
非特异性染色可能来源于两个方面,一是抗体的质量不好,二是用的是生物素-卵白素的检测系统但是没有用相应的封闭。抗体不纯或特异性差都可以适成非特异染色。如果是自己的抗体可以做一下纯化,如果是商业化的抗体则最好用单抗。封闭可以用免疫血清也可以用脱脂奶粉,效果都不错。
sswei
据认为温度在92℃-98℃是合适的,尤其在95℃为最好。
loveliufudan
通常情况下,煮脱蜡的温度在95-100摄氏度,时间在15-30分钟左右,具体取决于样本的种类和大小。对于较脆弱的组织样本,比如胸腺、淋巴结等,煮脱蜡的温度和时间可以稍微降低,以免损坏组织结构和抗原。
如果你的标本总是会脱片,可能是由于煮脱蜡的温度和时间过高或过长,导致组织结构和抗原的破坏。建议你重新调整煮脱蜡的条件,根据样本类型和大小调整温度和时间,以保持组织结构和抗原的完整性。同时,也可以在煮脱蜡之前加入一些保护剂,如甘油、BSA等,以减少组织的脆性和脱片的发生。
秋秋欣欣
脱片可能是载破片本身的问题或者片子切太厚了,中高火抗原修复比较合适。
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