哦呦呦呦321
本人打算做单克隆实验,但是老师要求用提取的淋巴细胞做抗原,感觉难度大,想请做过此方面实验的同仁师兄师姐师弟师妹们给出指导性的建议,个人感到一些困惑的地方是:1.对淋巴细胞的来源有没有要求,免疫同一只小鼠是不是一直用同一人的血液提取的淋巴细胞,还是可以一次不同人的淋巴细胞?2. 免疫小鼠需要的细胞量,一般需要多少血样?3 需要的注意事项?
huarenqiang5
免疫同一只小鼠建议用同一品类的血液提取的淋巴细胞。免疫小鼠1.0×10-2.5×10 个脾细胞。
土井挞克树
对淋巴细胞的来源是有要求的,为了避免误差,尽量选择同一人的血液提取的淋巴细胞
loveliufudan
进行单克隆实验需要制备适当的抗原来免疫动物,淋巴细胞可以是从小鼠、兔子、鸡等不同动物中提取。下面是对您提出的问题的回答:
对于淋巴细胞的来源,最好选择与免疫小鼠同一品系的同种小鼠,这样可以降低淋巴细胞与小鼠之间的异种反应。在同一品系的小鼠中,淋巴细胞来源可以不一样,但需要注意的是,在不同的小鼠之间,淋巴细胞的数量、质量等可能存在差异,因此需要控制好实验条件和方法,以确保实验结果的可靠性。
具体需要的细胞量取决于所使用的小鼠品系和实验设计,一般来说,从每只小鼠中提取的淋巴细胞数量可以在 1-2 x 10^7 个左右,如果需要更多细胞,可以使用多只小鼠或者通过体外培养增殖细胞。对于血样量,一般来说,从每只小鼠中取 0.5-1ml 的血液即可。
在进行淋巴细胞提取和抗原制备的过程中,需要注意以下几点:
保持实验环境清洁、无菌,避免污染和交叉感染。
操作过程需要细心、耐心,特别是淋巴细胞的提取、纯化和质量检测等步骤需要仔细操作,避免对细胞造成不必要的损伤和影响。
实验过程中需要注意细胞的保存、运输和储存条件,避免因操作不当导致细胞失活或质量下降。
实验设计要合理,控制好实验变量和样品处理过程,以确保实验结果的可靠性和准确性。
总之,制备抗原是单克隆实验中非常关键的一步,需要仔细操作和精心设计,才能得到满意的实验结果。
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