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层析纯化百科宝典

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重组标签蛋白_重组His标签蛋白NFP胞外结构域在SF9细胞中的表达与纯化
研究背景:植物细胞表面具有碳水化合物信号分子,因此能够与环境中的微生物发生联系。在这里,我们从两个赖氨酸基序受体外结构域的晶体结构中确定了LCO感知的结构基础,并在LCO识别和共生功能所必需的结合位点中鉴定了一个疏水斑块。两者一起引发植物中共生通路;本研究中使用层析技术,分别利用HisTrap excel和HisTrap HP捕获并富集目标蛋白,之后根据样品量的不同分别选用不同的凝胶过滤层析柱,去
天然蛋白_克雷伯氏肺炎菌封装体载体蛋白的表达与纯化
研究背景:封装体是自组装的蛋白质纳米亚结构,能够有选择性地封装特定的载体蛋白,包括参与铁储存、硫代谢和抗压应激的酶。它们代表了许多病原体采用的独特分区策略,以促进特定的代谢能力。封装由特定的载体蛋白结构域TP(Target peptides)介导,但目前对最大封装体载体类别——染料脱色过氧化物酶(DyPs)的封装结构基础尚不清楚。作者对来自肠道致病菌克雷伯氏肺炎菌的含DyP的封装体进行了表征,使用
膜蛋白_G-蛋白偶联受体在无去垢剂的情况下增溶的纯化研究
研究背景:G蛋白偶联受体 (GPCR) 构成人类基因组中最大的一类膜蛋白,具有 >800 个独特的受体。它们被极其多样化的刺激激活,这些刺激的物理化学性质和大小各不相同;从光子到小的生物胺,再到肽和糖蛋白 。GPCRs共享一个蛋白质结构,包括七个跨膜螺旋,并且在从病毒和黏菌到植物和人类的生物体基因组中都有代表。这类受体是细胞信号传导的核心,因此,这项研究对于药物治疗靶点发现很关键。。尽管普遍
酶类_来自高温厌氧杆菌属的丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶的纯化
研究背景:Wood-Ljungdahl pathway (WLP) 作为一种古老的碳固定通路,它依赖严格的厌氧微生物产乳酸菌、产甲烷菌、硫化菌和古生菌。在WLP途径中CO/CO₂和氢气为碳源和能源, 合成乙酰辅酶A(acetyl-CoA), 进行物质和能量代谢(acetyl-CoA。产乙酸菌再转化为乙酸。大多数产乙酸菌可以维持无机自养的生命循环,使用H2和CO作为电子供体固定CO2生成乙酸。WLP
多糖_分离纯化植物地参多糖抑制胃癌细胞凋亡的研究
研究背景:多糖是自然界中发现的最普遍的天然产物之一, 迄今为止,在众多研究中,植物多糖在体外和体内都发挥了广泛的生物活性,如抗氧化、降血糖、抗肿瘤、高血脂和抗凝活性等。地参 (A. asphodeloides)是一种多年生草本植物,广泛分布于中国和韩国,长期用作治疗咳嗽、潮汐热和缓解干燥综合征。尽管有大量研究报告了来自A. asphodeloides的低分子量植物化学物质的化学结构和生物活性,但尚
食品科学_基于纳米抗体的免疫技术检测牛奶中金黄色葡萄球菌
食物直接和间接被污染病原体后大大增加了人体感染几率,严重危害人类健康。其中金黄色葡萄球菌 S. aureus 就是一种重要的病原体,食品等相关产品被强制要求检测 S. aureus 菌落数。常用检测手段包括平板计数法、PCR 法、外毒素免疫法等,这些方法具有一定的局限性。文献研究和开发出基于直接针对灭活菌体的纳米抗体(Nanobody, Nb)的免疫检测方法。通过 ELISA 筛选出不与 IgG
抗体_从蛋黄中快速纯化 IgY 的新方法
利用禽源生产抗体有以下优点:首先,对母鸡进行免疫后,血清和蛋黄中都会产生相似浓度的特异性抗体。其次,与收集血液相比,收集和储存鸡蛋更容易,每周几个鸡蛋产生的抗体量足以媲美反复收集免疫兔血液所得到的抗体量。由于进化差异,高度保守、弱免疫原性的哺乳动物抗原也可使禽类产生较高水平的抗体应答。本文提出了一种在亲硫作用层析法基础上,使用 HiTrap IgY Purification HP 层析柱和 Sup
重组标签蛋白_SARS-CoV-2 刺突蛋白受体结合域与纳米抗体形成复合物的生成和结晶
SARS-CoV-2 刺突蛋白的受体结合域(RBD)可与上皮细胞表面的血管紧张素转换酶-2(ACE-2)结合并发生融合,从而使病毒进入细胞内。源自大羊驼(llama)的纳米抗体(VHH)可以与 RBD 结合,阻断这种相互作用,从而中和病毒。通过 X 射线晶体学方法对 VHH-RBD 复合物进行结构分析,可以精确地绘制 VHH 的抗体识别表位,并对变异突变所产生的影响进行解析和预测。因此,在这篇文章
未知样品鉴定_利用预活化填料将Ulp1固定化提高酶活和稳定性
研究背景纯化后的蛋白酶如果固定在填料上,会比游离的具有更长的稳定性,耐受广泛的温度条件、pH 范围、化学试剂,同时可以多次使用,提高底物/酶的比例,提高酶的使用效率和寿命。Ulp1 是 SUMO 标签重组蛋白常用的标签切除蛋白酶,将 Ulp1 偶联到 NHS 预活化填料上,能够极大地提高酶的适用条件和酶的稳定性。利用固定化的 Ulp1 酶和游离的酶进行活性对比,发现固定化的 Ulp1 酶可以耐受高
天然蛋白_使用 ÄKTA™ start 平台从血清样本中去除白蛋白
血清中包含上千种蛋白质,这些蛋白质在血清中的含量会随不同的生理或病理情况而变化。然而,血清中的某些蛋白质可能是某些疾病的潜在标志物,可用于监测疾病进展或治疗效果。但是血清中白蛋白占血清总蛋白的 55%~65%,如此高的丰度导致对血清中其他蛋白质的研究变得困难。因此,有效分离去除白蛋白是分离鉴定和表征低丰度蛋白的关键,有助于监测相关疾病进程。
多肽_重组肽 HIV 疫苗在大肠杆菌中的表达、纯化和复性
研究背景肝细胞生长因子 (Hepatocyte growth factor, HGF) 是一类多功能生长因子,具有刺激血管增生 作用,通过局部肌肉注射携带 HGF 基因的质粒 DNA 可明显促进肢体急性缺血部位新生血管的形成,在 临床上具有治疗缺血性疾病的应用前景该文章对此进行了大量的研究,通过成熟的工艺生产药用级重组质粒 pUDK-HGF 注射液。其工艺是碱裂解后离心处理获得澄清碱裂解液,直接用
表观遗传学_核小体组蛋白 H4 赖氨酸 20 经 SET8 甲基转移酶甲基化的机制研究
研究背景着丝粒是与有丝分裂纺锤体微管连接的特殊染色体区域,招募特定区域的核小体,其中着丝粒组蛋白变体即指用酵母中的 Cse4 取代了规范组蛋白 H3 后的产物。可以使用含 Cse4 的核小体进行原子结构测定,这是着丝点-核小体复合物的机理和结构研究的起点。在核小体的早期研究中,人们使用内源性来源的染色质,如鸡红细胞或大鼠肝脏进行提取。但近年来出现了新的标准方案,可以使用单个非洲爪蟾组蛋白表达作为包
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