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多糖_分离纯化植物地参多糖抑制胃癌细胞凋亡的研究

相关实验:蛋白质的层析纯化

最新修订时间:

简介

研究背景:

多糖是自然界中发现的最普遍的天然产物之一, 迄今为止,在众多研究中,植物多糖在体外和体内都发挥了广泛的生物活性,如抗氧化、降血糖、抗肿瘤、高血脂和抗凝活性等。地参 (A. asphodeloides)是一种多年生草本植物,广泛分布于中国和韩国,长期用作治疗咳嗽、潮汐热和缓解干燥综合征。尽管有大量研究报告了来自A. asphodeloides的低分子量植物化学物质的化学结构和生物活性,但尚未对其多糖的表征进行研究。

本研究旨在探索A. asphodeloides多糖在高温水提取和DEAE Sepharose Fast Flow柱纯化后的生物活性特性。进一步阐明多糖的化学结构和分子特征,并评估它们对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的诱导潜力和抑制癌细胞系生长的能力,研究其构效关系。

原理

图1 地参根茎提纯流程图

 

材料与仪器

步骤

实验方法:

取植物地参根茎粉碎后干燥,水提醇沉获得粗多糖,室温下干燥。

为了进一步纯化,将粗多糖溶解在蒸馏水中,上样到DEAE Sepharose Fast Flow层析柱上,用蒸馏水和浓度增加的NaCl溶液洗脱,流速为2.5 mL/min。分离后得到两个组分。浓缩、透析和冻干后命名为地参多糖1 (F1)和地参多糖2 (F2)。

随后对收集得到的两个组分进行单糖组成测定,分子量测定和甲基化分析,揭示多糖结构。同时对两个多糖组分进行了免疫活性研究,细胞毒性检测和细胞凋亡分析等。

 

Reference:

Cao RA, Ji R, Tabarsa M, et al. Purification, characterization and immunostimulatory effects of polysaccharides from Anemarrhena asphodeloides rhizomes. Int J Biol Macromol. 2021;172:550-559.

来源:丁香实验

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