蛋白质的层析纯化

蛋白质实验

别名：

chromatography，色谱，层析

最新修订时间：2022-07-18

简介

层析（chromatography）也称色谱，是利用蛋白质在流动相和固定相中分配不同的原理进行蛋白质分离纯化的方法。由于蛋白质理化特性的不同（分子形状、大小、极性及亲和力等），当蛋白质溶液流经固定相时，不同的蛋白质就会以不同强度的作用力结合在固定相上，实现蛋白质的分离。目前，用于蛋白质的层析纯化的方法主要有 4 种：凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析和疏水作用层析。

原理

层析的实验原理是利用蛋白质在流动相和固定相中分配不同的原理进行蛋白质分离纯化的方法。由于蛋白质理化特性的不同（分子形状、大小、极性及亲和力等），当蛋白质溶液流经固定相时，不同的蛋白质就会以不同强度的作用力结合在固定相上，实现蛋白质的分离。

应用

蛋白质分离

来源：丁香实验团队

操作方法

离子交换层析

离子交换层析（ion exchange chromatography, IEC）是依据流动相中不同蛋白质与离子交换树脂上电荷基团可逆结合力的差异进行分离的。离子交换树脂是一类不溶于水的、惰性的、带有某种电荷基团的高分子聚合物凝胶颗粒。

亲和层析

亲和层析（affinity chromatography）是蛋白质分离纯化最有效的方法之一，在个别情况下，仅此一步纯化即可得到高纯度的目的蛋白。