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RNA-FISH
毛利小五郎的徒弟
一般长链可剪切位点比较多,短链灵敏度高
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求助|有无大佬分享一下BV2细胞的分型免疫鉴定经验
麻黄连翘赤小豆
M1促炎M2抗炎,LPS和正常组肯定有区别表达,在此基础上,检测白介素6,12;4,10,13,炎症相关信号的激活也能说明一些问题
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PMA诱导THP-1贴壁却不分化?
毛利小五郎的徒弟
做实验时也是尽量要避光,你降低细胞密度会分化
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血管内皮通透性
loveliufudan
楼上说的很好,这里补充一个监测方法:还可以用电阻抗仪监测跨内皮细胞电阻(TER)来测量通透性。
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问
免疫荧光,BSA封闭液用水配行不
Marchers
直接用水配就行了,按体积比就行,相当于稀释,看你干什么用,如果还要做PCR的话,建议最好用去离子水或者超纯水
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求助RAW264.7细胞培养,复苏后由亮变暗像细胞碎片,是什么问题呀?
麻黄连翘赤小豆
这浮上去的都是细胞尸体,都没有圆圆的巨噬细胞形态,重新复苏新管子
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问
风险模型-生存分析
Marchers
看图不能直接判断风险模型的好坏,起码需要区分度和校准度,判断和预测值之间的差异;此外,净重分类指数NRI一般也是必须的。
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可以用培养基作为药物溶媒吗?怎么保证所溶药物是无菌的?
cubeamy1905
要看你所使用药物的性质噢,如果易溶于水,直接溶在培养基是没问题的,如果不易溶于水,则需要用有机溶剂,比如乙醇或dmso先溶解成保存液,再稀释到培养基里变成工作液。我们一般认为包装未拆封的试剂都是无菌的,在超净工作台里拆封溶解即可。如果使用的是外部拆封的试剂,则溶解后需要通过滤器过滤除菌。
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Chelex-100提取DNA,进行孵育放入冰箱保存,第二次使用,需要二次孵育吗?
毛利小五郎的徒弟
冰箱设置多少度?理论上不需要二次孵育
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问
细胞荧光染色背景很深
麻黄连翘赤小豆
缩小曝光时间就可以让背景变浅,再调整对比度
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Renca细胞长成拉丝状
毛利小五郎的徒弟
可能是消化过程中特定的酶没有被破坏
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问
APPswe/N2a细胞可以用来研究阿尔茨海默中的tau磷酸化吗
毛利小五郎的徒弟
是的,如果有药物双向抑制,那么冈显然不合适,现在一般用水合氯醛造模
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问
人角质形成细胞体外培养
申东熙老伯
加入诱导分化的因子之后 要培养一段时间才能观察到分化的现象。
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细胞技术
麻黄连翘赤小豆
增值的时候是会出现这些亮点的,这属于正常现象,不用管他,只要不污染就行
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问
钙离子载体ionomycin提高胞内钙离子浓度需要外加钙吗?
毛利小五郎的徒弟
需要,因为只有在高浓度时可以诱发细胞凋亡
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问
细胞是污染了吗
Marchers
图2和图5存在分化样变化,建议重新培养,对比一下;其他的都长得挺好,背景也挺干净
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问
卵巢组织如何制备单细胞悬液呢?
你好几和户
1. 用PBS清洗组织后放置在培养皿中,用手术刀将组织粗略的切碎。2. 这一步对于提高消化效率至关重要!3. 切碎的组织转移到含有胶原酶解离液的50 mL离心管中(10 mL/组织,但这取决于组织的大小)。4. 拧紧盖子,用封口膜密封。5. 37 °C 孵育45分钟。每10分钟摇晃一次。6. 用100 μm细胞过滤器过滤。450g离心5分钟。7. 小心去除上清液,留下的液体在0.5 mL和1mL之
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问
求TGF-B1诱导HK-2的具体操作
毛利小五郎的徒弟
HK-2以20万个细胞每孔接种于6孔板,24h后换为无血清培养基饥饿24小时后,给予10ng/ml TGF=beta刺激,48小时后观察并提蛋白
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DSS结肠炎
balalaLy
浓度太低,我们一般用3%浓度,不过不同厂家以及不同批号的DSS效果不一样
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详细临床观察和笼边观察的区别
Marchers
详细临床观察就是传统你的给药后,检测体内组织血液样本的生化浓度和生物度,一般反应体内的变化;笼边观察,顾名思义就是用来观察一些不能用待测指标来体现的,比如毒理实验的疼痛反应就是非常关键常用的,需要通过直观观察来通过一些量表评分反应疼痛结果。
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