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从ATCC购得的HK-2细胞,传2~3代就是状态不好,细胞形态像碎了一样,用的是DMEM/F12培养基和10%血清。请问怎么办

相关实验:细胞传代实验

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你好几和户

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6 个回答

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dxy_kza87kz2

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请问现在细胞状态怎么样了?使用K-SFM试试了吗?

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土井挞克树

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提高血清浓度减少细胞密度试一下。看能不能补救

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这是细胞培养条件适应的问题,ATCC的HK-2使用的是无血清培养基K-SFM,突然更换成DMEM/F12+10%FBS来培养,可能会出现细胞不适应以及状态变差的情况。正确的办法是先用原本的培养条件K-SFM扩增好之后,再尝试更换培养基。更换培养基时,建议先将两种培养基按比例混合使用后,再慢慢更换成想要的培养基

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loveliufudan

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细胞状态不佳和细胞形态的异常可能是由于多种因素导致的。以下是可能导致HK-2细胞形态异常的一些原因和可能的解决方法:

细胞过度生长或过度传代:过度生长或传代可能导致细胞形态异常和代谢活性下降。建议控制细胞传代次数,适时停止细胞生长以恢复其正常状态。

培养条件不适当:细胞的生长和形态受到培养条件的影响。如果细胞在DMEM/F12培养基和10%血清下无法正常生长,可以尝试更换培养基或血清,或者调整血清浓度,以适应细胞的需求。

细胞感染或受到污染:HK-2细胞可能会受到病毒、细菌、真菌等微生物的感染或污染,导致细胞形态异常和代谢活性下降。建议进行相关检测,如PCR、细菌涂片染色等,以排除细胞感染或污染的可能性。

细胞遗传突变:HK-2细胞可能会发生遗传突变,导致细胞形态异常和代谢活性下降。建议进行相关检测,如染色体核型分析、突变筛选等,以了解细胞的遗传背景。

综上所述,建议您检查细胞的传代次数、培养条件和可能的感染或污染等因素,并尝试进行相应的优化和处理。

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huarenqiang5

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考虑是否支原体污染。你的培养液颜色有无异常?建议你用Myco或者BMCyclin抗支原体试剂,4-6天细胞可以基本恢复正常,生长快速。

如果这样还不行的话,建议你换血清。培养基最好用液体的。

选择合适的pH值。

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balalaLy

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可能是消化过度或者有污染,也可能是培养基不合适。

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