HCT 116细胞很难消化成单细胞悬液，请问怎么解决？

看看细胞转状态有没有发生变化。

多次分批消化，减少每次消化的组细胞量

1. 培养过程中细胞密度不要过高，80%~90%即可传代，确保细胞不会过度密集； 2. 消化的时候胰酶量不要太多，一般T25瓶加1mL胰酶，轻轻晃动将瓶底覆盖后吸出多余的胰酶，保留0.5mL左右胰酶消化，消化过程中不要晃动培养瓶，避免细胞没分散好就从瓶底脱落。

HCT 116细胞是一种肠癌细胞系，由于其黏附性较强，因此确实较难从培养皿中消化成单细胞悬液。以下是几种可能的方法来解决这个问题：

酶消化：可以使用消化酶，如胰蛋白酶和DNA酶，来帮助消化细胞。通常，将HCT 116细胞用胰蛋白酶-EDTA消化一段时间，然后在振荡器上震荡分散细胞，最终过筛分离成单细胞悬液。

磨碎法：将HCT 116细胞收集到离心管中，加入一定量的PBS缓冲液，然后用超声波或研钵等工具进行磨碎，最终得到单细胞悬液。

筛选法：将HCT 116细胞收集到离心管中，用1000微米或500微米的滤网进行过筛，去除细胞团块和大的细胞碎片，最终得到单细胞悬液。

机械切割法：将HCT 116细胞用刮刀或刮片进行机械切割，直到细胞完全分散，最终得到单细胞悬液。

需要根据具体实验需要选择适合的方法，并注意操作时的卫生和消毒，以避免细胞污染和误差。

适当延长消化时间，多吹打几下。