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看看细胞转状态有没有发生变化。
毛利小五郎的徒弟
多次分批消化,减少每次消化的组细胞量
小小小小小芳
1. 培养过程中细胞密度不要过高,80%~90%即可传代,确保细胞不会过度密集; 2. 消化的时候胰酶量不要太多,一般T25瓶加1mL胰酶,轻轻晃动将瓶底覆盖后吸出多余的胰酶,保留0.5mL左右胰酶消化,消化过程中不要晃动培养瓶,避免细胞没分散好就从瓶底脱落。
loveliufudan
HCT 116细胞是一种肠癌细胞系,由于其黏附性较强,因此确实较难从培养皿中消化成单细胞悬液。以下是几种可能的方法来解决这个问题:
酶消化:可以使用消化酶,如胰蛋白酶和DNA酶,来帮助消化细胞。通常,将HCT 116细胞用胰蛋白酶-EDTA消化一段时间,然后在振荡器上震荡分散细胞,最终过筛分离成单细胞悬液。
磨碎法:将HCT 116细胞收集到离心管中,加入一定量的PBS缓冲液,然后用超声波或研钵等工具进行磨碎,最终得到单细胞悬液。
筛选法:将HCT 116细胞收集到离心管中,用1000微米或500微米的滤网进行过筛,去除细胞团块和大的细胞碎片,最终得到单细胞悬液。
机械切割法:将HCT 116细胞用刮刀或刮片进行机械切割,直到细胞完全分散,最终得到单细胞悬液。
需要根据具体实验需要选择适合的方法,并注意操作时的卫生和消毒,以避免细胞污染和误差。
balalaLy
适当延长消化时间,多吹打几下。
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