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科研学霸天团，48小时有问必答

问Tunel染色滴加DNase I的问题

毛利小五郎的徒弟

不可以的，即使已经做过处理，还是需要滴加DNase I，防止误差

2 回答170 围观

问求问流式检测小鼠CD8的颗粒酶b需要刺激吗？

elabscience

颗粒酶B属于分泌性物质，检测前需要进行刺激阻断。

2 回答176 围观

问肠原代细胞制备时常伴有粘液且易污染问题

Marchers

能不能加点酶来去除一下粘液，至于如何避免培养细胞的污染，我只能说要严格遵循无菌操作流程，另外培养基和PBS的存放和配置都要注意，一旦发现培养箱中有污染的细胞就要尽快扔掉并对培养箱进行消毒。

3 回答65 围观

问hepg2细胞堆叠长了形貌发生了好大变化，这是细胞老化了吗？

hy-cell

保证培养基不干的情况下尽可能不动它，让它缓缓，长密点看看状态会不会恢复吧

5 回答212 围观

问求求大神看看这是细胞污染吗？！

Marchers

片状物不是污染，背景很干净，不是污染；而且能用PBS冲洗掉，说明可能是死亡细胞

5 回答81 围观

问293T这个细胞形态正常吗

申东熙老伯

正常，细胞密度问题，第一张是传代的时候没把细胞摇匀。

4 回答316 围观

问LC3B的电泳条件是什么才能跑出漂亮的条带呢？

毛利小五郎的徒弟

LC3分子量比较小，只有16KD，在电泳的时候需要使用12%-15%的胶，避免跑过。转膜的时候需要使用0.22um的膜，缩短转膜的时间，40min即可。切莫使用0.45um的膜，否则量相对少的LC3I更不容易显出来。

3 回答1043 围观

问培养基中的酵母提取物灭菌问题

申东熙老伯

一次不要配太多，用孔径小的滤膜在超净台过滤除菌。

2 回答123 围观

问神经干细胞自发分化

毛利小五郎的徒弟

不正常，正常不会有这么多死细胞。

1 回答159 围观

问CHIP超声！细胞一半超过了，一半完全没超开

毛利小五郎的徒弟

细胞密度过高，超声就可能超不过气，建议调整细胞密度。

1 回答76 围观

问msc细胞这样拉丝？爆炸？是什么状况啊

毛利小五郎的徒弟

可能是你接种密度太低。无血清培养基必须高密度接种，接种密度过低，会导致细胞长不起来，呈现拉丝状

1 回答86 围观

问求助,HepG2细胞长得好慢

juyue2010

铺细胞不能太稀，会导致细胞生长缓慢，铺的数量一致，做到可控。

3 回答901 围观

问肾脏HE

毛利小五郎的徒弟

一般来说冠状面看到的解剖清晰。

1 回答78 围观

问请问Hippo信号通路中的active YAP 、YAP、P-YAP之间的区别，急求，感谢各位

毛利小五郎的徒弟

这些都是Hippo信号通路中的不同的调控通路，像YAP就是磷酸化后进入胞浆的调控。

1 回答210 围观

问mTOR磷酸化位点有很多，怎么选择呢？

毛利小五郎的徒弟

根据自己的实验需求，做筛选试验。

2 回答105 围观

问Trizol提取RNA，加氯仿离心后没有分三层，为什么啊？

juyue2010

与你的离心机转子角度有关，你吸取上层水相就好

3 回答411 围观

问LC3用15％的胶，还是分不开是怎么回事，是电泳时间太短吗？

毛利小五郎的徒弟

有可能是缓冲液的问题，延长电泳时间

4 回答95 围观

问FUNDC1线粒体自噬 p62

balalaLy

文献中没有找到不代表就没有，你的实验做出来了只要符合逻辑，说得通，反而是好事。

2 回答144 围观

问求问细胞he染色操作步骤

毛利小五郎的徒弟

内皮细胞HE染色步骤：1、脱蜡，脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟，事先准备好盖玻片。2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分钟，自来水冲洗5分钟×3。3.、苏木精染色5分钟，根据染色情况，可以适当增加或减少染色时间，流水冲洗。4、5%乙酸分化1分钟，流水冲洗，用吸管滴加乙酸，布满玻片上的组织即可，分化后颜色变浅了一些，成为蓝色。5、返蓝：返蓝液，实验室没有，也可不用。6、伊红染色1

1 回答122 围观

问bv-2培养

毛利小五郎的徒弟

这个细胞有时候会自激活，这个要注意。

1 回答104 围观

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