土井挞克树
可以加用pbs冲洗,然后用流式进行分选去除死细胞
loveliufudan
可以尝试以下方法清洗细胞:
用PBS缓冲液冲洗细胞:可以使用温和的PBS缓冲液轻轻地冲洗细胞,以将死细胞从培养皿表面移除。
使用细胞去除剂:可以使用一些特殊设计用于去除死细胞的细胞去除剂,例如 Trypsin-EDTA 等。使用前需先按照说明书进行操作,并注意时间不要过长以避免对存活细胞造成伤害。
机械振荡:对于一些比较难以去除的死细胞,可以尝试通过培养皿的机械振荡来去除。可以将培养皿放在震荡器中振荡一段时间,将死细胞从表面清除。
更换培养基:在上述方法无法有效去除死细胞时,可以尝试更换培养基,以清除细胞表面的死细胞。
需要注意的是,在清洗细胞时应该尽量避免对存活细胞的伤害,尤其是在使用细胞去除剂和机械振荡的时候,一定要注意操作的时间和力度。此外,对于不同类型的细胞和药物,可能需要采用不同的清洗方法。
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以下方法: 1 稀释法。细胞稀释后还能增殖,会越来越多,而细胞碎片相应地会越来越少。 2.自然沉降法。将细胞悬液移到离心管中,等细胞大部分下沉时,可将上液吸弃,再加入培养液悬浮细胞,此方法可反复使用,同时每次可显微镜下观察是否符合你的要求。
一般来说悬浮细胞除死细胞比较困难,可用提高血清浓度,让细胞分裂(cell division)增殖快,用替代法一点一点减少死细胞数量,也可以将细胞瓶竖起静置数分钟,轻轻的将上曾培养基吸走可除去部分死细胞,还有就是用标记annexinV的磁珠将凋亡和死亡的细胞除去。
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有一招屡试不爽,那就是用 PBS 洗两遍之后,加胰酶进去,晃一晃,迅速将胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死细胞由于粘附能力很弱,第一次加胰酶进去以后会掉下来,第二次加胰酶下来的细胞才是活性比较强的细胞。整完一次之后,再次传代方法同上,一般 2~3 次之后,细胞就完好如初了。
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