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科研学霸天团,48小时有问必答
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coip细胞裂解液求助
loveliufudan
进行膜蛋白的共免疫沉淀(Co-IP)实验时,选择合适的裂解液配方是非常重要的。裂解液的成分应该能够充分裂解细胞膜,并保持目标蛋白质的稳定性和功能。以下是一种常用的裂解液配方,供参考: 1. 缓冲液:选择适当的缓冲液,如磷酸盐缓冲液(PBS)或甘氨酸盐缓冲液(Tris-Glycine),pH值根据实验需求选择合适的范围。 2. 蛋白酶抑制剂:添加蛋白酶抑制剂,如苯甲砜(PMSF)、氨基甲酸甲酯(AM
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问
lncRNA过表达
dxyc42u
可以参考某些文章中敲低某个基因的剂量做预实验
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问
RTqPCR,microRNA
dxyc42u
肯定是相同质量,如果是体积一样的话,样本间本身就有差异无法比较
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问
请问circRNA的convergent引物怎么设计啊
沉沦6RZH
https://www.sohu.com/a/215186821_802014
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问
请问体外转录后的RNA有两条带怎么办
dxyc42u
杂带有可能是引物二聚体导致的,重新设计引物
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求助|RNA琼脂糖凝胶电泳的RNA Marker 老是跑不好是为啥啊
dxyc42u
可以增大电泳时的电压试一试看。
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如果用流感病毒假病毒感染巨噬细胞,能引起细胞因子的分泌吗?
毛利小五郎的徒弟
可以的,假病毒也是可以引起细胞因子分泌的
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冈田酸如何溶解能让DMSO<0.1%并且不析出?
毛利小五郎的徒弟
把dmso稀释后润洗就可以不析出了。
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CTAB法提取RNA
毛利小五郎的徒弟
CTAB提RNA步骤:1.取1.5ml的离心管加入1ml预热的CTAB缓冲液(亚精胺)(65度),加20ul(β-巯基乙醇)。2.取材料研磨加入1.5ml的离心管中65度,10min(15min)加热,期间多次震动,摇匀。3.取上清至另一1.5ml加入等体积氯仿异戊醇(24:1)振荡摇匀,4度,12000rpm,10min离心,取上清至另一1.5ml的离心管中。4.重复一次。取上清至1.5ml的离
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求问,这个真菌污染是哪种菌呢,感染源都可能是哪里
loveliufudan
这种症状与真菌感染相符,但不能确定是哪一种真菌。真菌感染通常会导致培养基浑浊、pH变化,细胞表现出明显的异常现象,例如细胞形态异常、生长迟缓、凋亡等等。因此,建议你进行真菌检测以明确是否为真菌感染,并采取相应的措施。常用的真菌检测方法包括PCR、荧光染色和培养等。另外,建议你对细胞房进行全面的清洁和消毒,确保细胞环境的卫生和安全。
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问
请问一下这样的RNA还有救吗?
dxy_mqg1dtg8
不能用了吧,出现双峰说明RNA已经被污染了,而且A260/A280正常应该在2.0左右,你这个太小了,A260/A230应该在1.8-2.2之间,你这个也太小了。
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问
RNA pull-down做WB结果不稳定
sswei
可能样品中的互作蛋白表达量很低或样品中存在杂蛋白。
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细胞体内倍增时间跟体外倍增时间的换算
毛利小五郎的徒弟
可以用公式(DT=undefined[lg2/(lgNt-lgNo)])计算。t为培养时间,No为首次记下的细胞数,Nt为t时间后的细胞数。一般No在接种细胞24小时后进行。体内与体外的细胞增殖曲线不同,得到的数据不同,需要分别计算后进行比较
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trizol法提视网膜RNA,超声破碎仪破碎的,最终没有沉淀,浓度很低很低,求问到底是为什么???
loveliufudan
可能有几个原因导致您使用 Trizol 法提取视网膜 RNA 没有得到高浓度的沉淀:样品量太少:视网膜是一个很小的组织,可能需要更多的样品来得到足够的 RNA。您可以尝试使用更多的视网膜组织来提取 RNA。超声破碎不充分:超声破碎仪需要将样品完全破碎,以释放细胞内的 RNA。您可以尝试增加超声破碎的时间或使用更高功率的仪器。酚/氯仿提取不充分:在使用 Trizol 提取 RNA 时,关键的步骤是酚
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问
如何寻找前体RNA的序列
loveliufudan
要查找一个基因的前体RNA序列,可以使用一些公共数据库或基因组浏览器来获取。以下是一些可供参考的数据库和工具:NCBI:通过NCBI网站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)可以查找已知基因的前体RNA序列。在该网站上,可以通过输入基因名称或NCBI基因ID来查找所需的信息。UCSC Genome Browser:UCSC基因组浏览器(https://genome.ucsc
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RNA提取试剂盒提取FLS细胞RNA浓度好低啊…
loveliufudan
RNA浓度仅50ng/ml是比较低的,可能是提取过程中出现了一些问题,例如细胞裂解不彻底、RNA沉淀不完整等等。如果使用RNA提取试剂盒时出现这种情况,可以尝试以下方法:细胞裂解:使用更彻底的方法裂解细胞,例如用高压细胞破碎器或液氮快速冻存再破碎等。提取过程中注意力度:注意所有步骤的细节,尤其是沉淀时离心时间和转速,可以增加离心时间或者提高离心转速,使得沉淀更完整。使用其他方法:如果使用RNA提取
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问
rpm换算
sswei
在3cm的旋转半径下,每300xg的离心力的速度约为2990rpm。每分钟转数(RPM)和相对离心力(xg)之间的关系为:g=(1.118×10-5)RS2,其中g是相对离心力R是转子半径,单位为厘米,S是离心机每分钟的转速.
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求石蜡切片提取RNA的方法
毛利小五郎的徒弟
石蜡切片提取rna步骤:1. 请自行准备:无水乙醇、生理盐水、二甲苯及无RNA酶1.5mL离心管。2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作:a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇,混匀;9mL加入51mL无水乙醇,混匀。b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇,混匀;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。3. 样本处理:a)
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AAV诱导microRNA高表达检测不到差异表达
loveliufudan
可能的原因如下:AAV转染的效率不高,导致microRNA的表达量不足以被检测到。可以尝试使用更高效的转染方法或者使用更高的病毒滴度来提高转染效率。microRNA前体的转录效率低,导致microRNA的表达量不足以被检测到。可以尝试使用更强的启动子来提高转录效率。检测microRNA的方法可能不够灵敏。可以尝试使用更灵敏的检测方法,如qRT-PCR或RNA测序等。microRNA可能被降解了,或
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小干扰被紫外灯照射了10分钟
毛利小五郎的徒弟
可以用,赶紧远离紫外灯但不排除小部分变性
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