奔波儿灞与驴
这张图是胶回收产物跑的电泳
这张图是体外转录成RNA的电泳图
请问第二条泳道的基因有杂带是什么原因,有办法解决吗?影响注射吗?
dxyc42u
杂带有可能是引物二聚体导致的,重新设计引物
loveliufudan
有以下几个可能的原因和解决方法:
1. 反向转录产物:如果您在体外转录反应中使用了DNA模板进行反向转录,可能会出现两条带。一条带代表目标RNA的反向转录产物,另一条带可能是DNA模板的残余。您可以尝试使用RNase H消化DNA模板,或者选择使用线性化的模板来减少DNA污染。
2. 预测性剪切:某些RNA分子在转录过程中可能会发生预测性剪切,导致产生不同长度的转录产物。这种情况下,您可以通过减少反应时间或优化反应条件来调整剪切效果,以获得单一的转录产物。
3. 异构体:某些RNA分子具有多个异构体,它们在长度上可能有所不同。这种情况下,您可以尝试优化反应条件,如温度、时间和酶浓度,以选择性地增加或减少某些异构体的产生。
4. 降解产物:在体外转录后,RNA可能会受到降解作用,导致产生不同长度的降解产物。您可以尝试使用RNase抑制剂或优化反应条件,以减少降解的影响。
在解决这个问题时,建议您进行一些实验来进一步调查和验证。您可以尝试优化反应条件、改变酶浓度、使用RNase消化或其他相关方法,以获得更清晰和一致的转录产物。
毛利小五郎的徒弟
有杂带可能是rna存在降解,建议去除杂带再注射,避免干扰
奔波儿灞与驴
请问体外转录后的RNA怎么去除杂带啊
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