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求助|RNA琼脂糖凝胶电泳的RNA Marker 老是跑不好是为啥啊

相关实验:用T4 RNA 连接酶连接 RNA 分子

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霁风001

为啥这个Marker就是跑不开啊啊啊啊啊

最左边那道是DNA Marker 右边三道都是RNA marker ,用的loading dye 不一样

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3 个回答

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dxyc42u

有帮助

可以增大电泳时的电压试一试看。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

marker浓度太高了,降低浓度再跑试一试,浓度太高电压不够就跑不开,稀释后再跑。

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loveliufudan

有帮助

如果在RNA琼脂糖凝胶电泳中无法正确分辨RNA Marker的条带,可能有以下几个原因:

1. Marker浓度问题:确保在电泳前将Marker适当稀释。过高的浓度可能导致Marker条带过于浓厚,难以分辨。尝试不同的稀释倍数,以找到最适合的Marker浓度。

2. 电泳条件问题:电泳条件对于分离Marker条带也很重要。确保使用适当的电泳缓冲液,并根据Marker的大小和电泳条件调整电流和电泳时间。过高的电流或过长的电泳时间可能导致Marker条带模糊。

3. 凝胶浓度问题:使用适当浓度的琼脂糖凝胶,以便能够有效分离Marker条带。不同大小的RNA Marker可能需要不同浓度的琼脂糖凝胶。

4. 染料问题:确保使用适合RNA的染料。一些DNA染料对RNA的染色效果不理想,可能导致Marker条带无法清晰可见。尝试使用专门用于RNA的染料,如EtBr (乙溴化乙锭) 或SYBR Green等。

5. 样品处理问题:在处理和加载Marker之前,确保样品中没有残留的RNA酶或蛋白质。这些杂质可能影响Marker的分离和可视化。

6. Marker质量问题:确认RNA Marker的质量良好,没有降解或污染。使用新鲜的Marker,或者尝试使用另一种商用的RNA Marker。

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