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可能有几个原因导致您使用 Trizol 法提取视网膜 RNA 没有得到高浓度的沉淀:
样品量太少:视网膜是一个很小的组织,可能需要更多的样品来得到足够的 RNA。您可以尝试使用更多的视网膜组织来提取 RNA。
超声破碎不充分:超声破碎仪需要将样品完全破碎,以释放细胞内的 RNA。您可以尝试增加超声破碎的时间或使用更高功率的仪器。
酚/氯仿提取不充分:在使用 Trizol 提取 RNA 时,关键的步骤是酚/氯仿分离,如果没有分离到足够的 RNA,最终的沉淀可能会很少。您可以尝试重新进行酚/氯仿分离步骤。
洗涤步骤不充分:洗涤步骤是为了去除杂质,如果洗涤不充分,杂质会干扰 RNA 沉淀。您可以尝试增加洗涤步骤或使用更高质量的酒精。
RNA 降解:RNA 很容易被降解,如果在提取过程中没有保护好 RNA,它可能已经被降解了。在提取 RNA 时,确保使用 RNase-free 的试剂和工具,并在处理样品时尽可能快地进行。
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