RNA的提取用什么方法最好，检测结果如何最准确？

我们用的是公司的总RNA试剂盒,浓度和纯度都挺好的

常见的RNA提取方法

i沉淀法

Trizol裂解液是总RNA提取的常用试剂, 内含苯酚、异硫酸胍等物质，能迅速破碎细胞，释放核酸，并抑制细胞释放的核酸酶。

1）组织中提取RNA: 第一步需要液氮研磨，将组织块放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织块变软，再次加入液氮研磨，反复三至四次后加入50-100mg/ml的Trizol，转入离心管中，室温放置10min，使其充分裂解。12000rpm，离心5min，弃掉沉淀。细胞中提取RNA：根据细胞量加入对应的Trizol，在摇床放置10-15min后，收集到离心管中。

2）按照200ul氯仿/ml Trizol加入离心管中，混匀后室温放置10min（切勿用涡旋振荡仪，防止基因组DNA断裂）。

3）4℃，12000rpm，离心15min。

4）将上层水相转移到新的离心管中，按照500ul异丙醇/ml Trizol加入离心管中，室温放置10min。

5）4℃，12000rpm，离心15min。

6）按照1ml 75%无水乙醇/ml Trizol，加入到离心管中，4℃，12000rpm，离心10min清洗一次RNA沉淀，室温放置5min左右晾干（RNA不可过于干燥，否则很难溶解）。

7）加入适量DEPC水溶解RNA，在Nanodrop上测定RNA浓度。

ii试剂盒法

主要是利用离心柱法提取RNA，具体可根据各试剂盒的说明书进行提取。主要利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，在于操作简单，耗时短，RNA完整性好，但是有的试剂盒浓度、纯度略低于沉淀法。

主要有苯酚、异硫氰酸胍、CTAB、LiCl密度梯度、Trizol等方法。现在常用的是Trizol法。我们实验室都是用的离心柱提取，感觉效果不错。