微生物实验

绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）是一种需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性菌，广泛存在于土壤、水体和医院等环境中，是一种常见的致病菌。绿脓杆菌的培养通常使用液体培养基或固体培养基，通过提供适当的营养物质和条件，促进绿脓杆菌的生长和繁殖。测定绿脓杆菌的方法包括生化试验、分子生物学方法、荧光染色法等。

多重 PCR 是一种在普通 PCR 基础上建立的一种可以同时扩增多个目的片段的检测多种细菌分子生物学的技术，其利用多对特异性引物同时扩增，提高了扩增效率，节省了成本。优点在于检测的速度快、准确性高和操作简单，特别适用于临床、环境和食品检测等领域。

低 pH 孵放技术是一种病毒灭活方法，适用于水痘疫苗、流感疫苗等多种病毒。该方法通过降低 pH 值和提高温度来灭活病毒，从而保证疫苗的安全性。

质粒DNA 和其他包装质粒共转染至细胞（293T 细胞）产生病毒，称为病毒包装。

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分枝杆菌培养包括改良罗氏培养和液体培养（如 BD MGIT 960 液基培养）。目前，固体罗氏培养法是我国最常用的实验室结核杆菌培养方法，该方法非常具有代表性。结核杆菌在固体培养基上生长，菌落形态清晰可见，其中菌落形态较典型的样本可以通过直接观察菌落的形态即可做鉴别，因此固体罗氏培养法常用于临床疑似结核病标本的分离培养、鉴别、保存菌种及抗结核药物敏感性测定等。而且相较于涂片检查法，改良罗氏固体培养

最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration， MIC）是指能够抑制微生物生长、繁殖的最低药物浓度。MIC 测试方法有很多种，常见的测试方法有如下三种：微量稀释法、琼脂稀释法、E-test 法。

本实验来源于贵阳中医学院基础医学实验教学中心网站

人类嗜 T 细胞病毒（HTLV）是第一个被发现的与人类癌症相关的反转录病毒，可分为 HTLV-1 型和 HTLV-2 型。HTLV-1 是 1978 年从人类 T 淋巴细胞白血病患者的淋巴结及外周血淋巴细胞中分离到，HTLV-1 型主要感染 CD4+ T 淋巴细胞并在其中生长，使受感染的 T 淋巴细胞转化，最后发展成为 T 淋巴细胞白血病，是成人 T 淋巴细胞白血病（adult T cellleu

人类免疫缺陷病毒（HIV）是人类获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）即艾滋病的病原体。AIDS 是美国 Gottlieb 于 1981 年在同性恋患者中首次发现。1983 年法国巴斯德研究所 Luc Montaginer 等首先从 1 例慢性淋巴结病的男性同性恋患者血中分离并鉴定出 HIV-1。现在 AIDS 已在全世界范围内流行，

肮粒病是一种慢性退行性， 致死性中枢神经系统疾病。人类及多种动物可通过遗传因素、后天环境或自身行为感染肮粒病。其潜伏期较长， 病程进展迅速， 死亡率 100％， 临床表现以痴呆、震颤， 共济失调等中枢神经系统症状为主。该病的传染因子是自身表达的结构异常的肮粒蛋白。正常肮蛋白 PrP 广泛存在， 主要以 α－螺旋结构存在， 病变后肮粒 PrP 产发生构象变化， 大量 α－螺旋转变为 β－折叠，PrP

肮粒病的临床诊断可根据流行病学特征、临床表现、病理学检查、生物标记物蛋白以及基因检测等进行判断。但肮粒病的确诊离不开病原学检查， 目前主要通过免疫组织化学法 （immunohistochemistry ， IHC）。 免疫印迹法 （Western blot ， WB）检测脑组织中 PrP。由于目前尚缺少可区分 PrP 和 PrP 的特异性抗体， 根据 PrP 对蛋白酶 K 消化耐受， 而 PHP

肮粒 （Prion,PrPS ） 又名脉病毒、肮毒体， 是一类由宿主细胞基因编码， 构象异常的蛋白，其不含核酸， 抵抗力强， 具有自我复制能力和传染性， 可引起多种哺乳动物发生传染性海绵状脑病 （transmissible spongiform encephalopathies , TSEs）， 如羊瘙痒病、克雅病、库鲁病、疯牛病等。目前在人类及 20 余种动物中发现有 10 多种自然发生或感染的

皮肤和黏膜感染病毒是主要通过皮肤和黏膜进入人体，引起皮肤、黏膜及全身感染，甚至导致其他器官损害的一大类病毒，其种类繁多，主要为双链DNA病毒，有的有包膜，有的无包膜，包括痘病毒、疱疹病毒、乳头瘤病毒、RNA病毒（如手足口病毒）等。

病毒性胃肠炎（viral gastroenteritis）又称病毒性腹泻，是一组由多种病毒引起的急性肠道传染病，是人类最常见的疾病之一，该类病毒也称为腹泻病毒。临床特点为起病急、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、排水样便或稀便，也可有发热及全身不适等症状，病程短，且病死率较低。腹泻病毒是胃肠炎的重要病因，各种病毒所致胃肠炎的临床表现基本类似。其他病毒如流感病毒、SARS冠状病毒、登革热、肝炎病毒、肠道病毒等

胃肠道感染病毒是一类通过胃肠道感染与传播的病毒，主要包括肠道病毒和急性胃肠炎病毒，其中肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒和新型肠道病毒，可引起温和、急性、自限性的胃肠炎，也可引起危及生命的心、肝和中枢神经系统的肠道外感染疾病；而肠道病毒之外的胃肠道感染病毒，包括轮状病毒、杯状病毒、星状病毒和肠道腺病毒等，则主要引起病毒性胃肠炎等肠道内感染性疾病，表现为腹泻呕吐等临床症状，又称急性胃肠

呼吸道感染病毒是指主要通过呼吸道进入人体，引起呼吸道或全身感染，甚至其他器官损害的一大类病毒。呼吸道感染病毒种类繁多，既有RNA病毒，也有DNA病毒，主要包括流行性感冒病毒、副流感病毒、冠状病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腺病毒、腮腺炎病毒和水痘带状疱疹病毒等。

虫媒病毒（虫媒病毒）是指一些通过吸血节肢动物叮咬捕捉而引发的自然奇源微生物及人兽疾病的好消息，包括不同基因组的病毒家族，如黄病毒科（黄病毒科） 、黄病毒属（Flavivirus）、披膜病毒科（togaviridae）、甲病毒属（Alphavirus）、布尼亚病毒科（bunyaviridae）、呼肠孤病毒科（reoviridae）以及正粘病毒科（orthomyxoviridae）。节肢动物传播的病毒

常用的虫媒病毒检测方法包括直接检测法、血清学检测法、病毒分离和鉴定。

虫媒病毒（ arbovirus）是指一些通过吸血节肢动物叮咬敏感脊椎动物而引起的自然疫源性疾病及人兽共患病的一群病毒，包括不同基因组的许多病毒家族，如黄病毒科（flaviviridae）黄病毒属（Flavivirus）。披膜病毒科（ togaviridae）甲病毒属（Alphavirus）。布尼亚病毒科（bunyaviridae）、呼肠孤病毒科（reoviridae）以及正黏病毒科（orthomy