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微生物超氧化物歧化酶(SOD)活性测定

实验分类:

微生物实验

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合作专家 | 江佳红硕士

生物物理学 大连海事大学

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简介

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原理

SOD 是一种广泛存在于生物体内的金属酶,是重要的氧自由基清除剂,能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。

通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-),与 WST-8 反应生成水溶性紫色甲臜;SOD 可清除 O2-,从而抑制了甲臜的形成;反应液紫色越深,说明 SOD 活性愈低,反之活性越高。

 

应用

检测样品中 SOD 的活性。

来源:Zhang, J., Chen, R., Yu, Z. and Xue, L. (2017). Superoxide Dismutase (SOD) and Catalase (CAT) Activity Assay Protocols for Caenorhabditis elegans. Bio-protocol 7(16): e2505.

操作方法

🔥 秀丽隐杆线虫中超氧化物歧化酶(SOD)活性测定

A.样品制备1. 样品收集整个方案使用 L4 期线虫作为参考点。用 1.6 mL 磷酸盐缓冲盐水(PBS, pH 7.0)将每个线虫生长平板上的 L4 期线虫洗到 1.5 mL 离心管中。在 4 ℃ 下,重力沉降 30 min 后,小心地移出并丢弃上清。加入 500 μL 预冷的 PBS,温和重悬沉淀,然后进一步沉降 15 min。然后,丢弃上清,加入 500 μL 预冷的 PBS,轻柔重悬,根据

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