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简介
多重 PCR 是一种在普通 PCR 基础上建立的一种可以同时扩增多个目的片段的检测多种细菌分子生物学的技术,其利用多对特异性引物同时扩增,提高了扩增效率,节省了成本。优点在于检测的速度快、准确性高和操作简单,特别适用于临床、环境和食品检测等领域。
原理
多重 PCR 技术是在常规 PCR 的基础上加以改进后的一种新型技术,其基本原理与常规 PCR 相同,是通过聚合酶链式反应来达到目的片段的扩增。
当 DNA 双链处于 90 ℃ 高温时,双链 DNA 会解旋成单链 DNA;当温度降到 60 ℃ 左右时,引物与特定的靶序列相结合; 当温度升到 72 ℃ 时即为 DNA 聚合酶的最适温度,在依靠多种 dNTPs 底物的基础上再通过碱基互补配对原则从而完成单链 DNA 的延伸工作,最终完成 DNA 双链的配对合成。
多重 PCR 与常规 PCR 的区别在于同一个反应体系中所加入的引物对数不同。多重 PCR 可以特异性扩增出多条目的 DNA 片段。反应体系的组成和 PCR 循环的条件需要经过优化以确保同时扩增多个 DNA 片段。理论上只要 PCR 扩增的条件合适,引物对的数量可以不限,但由于各种条件的限制,实际能够扩增的引物对数量是有限的(~1 000 对)。
来源:
操作方法
多重 PCR 是一种在普通 PCR 基础上建立的一种可以同时扩增多个目的片段的检测多种细菌分子生物学的技术,其利用多对特异性引物同时扩增,提高了扩增效率,节省了成本。优点在于检测的速度快、准确性高和操作简单,特别适用于临床、环境和食品检测等领域。