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微生物的培养和鉴定

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

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合作专家 | 李锦斐博士

肿瘤学 北京协和医学院

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审核专家 | 张望博士

感染病学 浙江大学

简介

分枝杆菌培养包括改良罗氏培养和液体培养(如 BD MGIT 960 液基培养)。目前,固体罗氏培养法是我国最常用的实验室结核杆菌培养方法,该方法非常具有代表性。

结核杆菌在固体培养基上生长,菌落形态清晰可见,其中菌落形态较典型的样本可以通过直接观察菌落的形态即可做鉴别,因此固体罗氏培养法常用于临床疑似结核病标本的分离培养、鉴别、保存菌种及抗结核药物敏感性测定等。而且相较于涂片检查法,改良罗氏固体培养阳性率更高。

原理

在加热条件下,分枝杆菌细胞壁中的分枝菌酸可与复红染液牢固结合成复合物,经盐酸酒精处理后也不会脱色,因此再加染后分枝杆菌仍然呈现红色,而背景和其他杂菌中则呈蓝色。

目前,Ziehl-Neelsen 痰涂片镜检也是我国结核病相关实验室使用最为普遍的方法,其操作简单快捷,特异性高,实验成本低。

荧光色素金胺「O」是一种含有自由氨基的金黄色碱性染料,能产生较强的荧光色素,且具有选择性,其离子带有阳电荷,而结核杆菌带有阴电荷,因此金胺「O」能和带阴电荷的抗酸杆菌结合而着色,在荧光显微镜中的高压汞灯的紫蓝光照射激发下,使带金胺「O」染色的结核菌发出很强的桔黄色荧光,检查时用高倍镜即可查见明亮细菌。 

来源:

操作方法

🔥 分枝杆菌的培养和鉴定

分枝杆菌培养包括改良罗氏培养和液体培养(如 BD MGIT 960 液基培养)。目前,固体罗氏培养法是我国最常用的实验室结核杆菌培养方法,该方法非常具有代表性。结核杆菌在固体培养基上生长,菌落形态清晰可见,其中菌落形态较典型的样本可以通过直接观察菌落的形态即可做鉴别,因此固体罗氏培养法常用于临床疑似结核病标本的分离培养、鉴别、保存菌种及抗结核药物敏感性测定等。而且相较于涂片检查法,改良罗氏固体培养

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