细胞实验

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传代细胞培养实验，主要用于传代细胞生长繁殖。根据不同细胞采取不同的方法：贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代，悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。

DoubletFinder 方法基于表达矩阵识别双细胞，将模拟的双胞与原细胞矩阵混合，进行降维聚类，根据每个细胞 k 近邻细胞中模拟双胞的比例结合 Poisson 分布进行排序、过滤。单细胞测序期望每个单细胞反应室（GEM）里包含一个细胞或者细胞核，即每个 barcode 对应一个真实的细胞，但是单个 barcode 包含的细胞数目随着上机细胞的浓度而改变，实际数据中会有两个或多个细胞共用一个 b

铜依赖性细胞死亡是一种新形式的细胞死亡方式，被定义为非凋亡性细胞死亡途径。在健康的细胞中，铜离子通过铜转运蛋白进入细胞内，同时通过线粒体中的氧化还原酶等参与氧化-磷酸化反应，完成细胞代谢过程。但是当细胞内铜离子浓度过高，或者铜转运蛋白、氧化还原酶等出现缺失时，过量铜离子就会在细胞内累积，诱导氧化应激、细胞膜 DNA 损坏、从而影响细胞的正常功能，最终导致细胞死亡。

使用 seahorse 仪器检测细胞能量代谢状况，具体包括细胞有氧呼吸和糖酵解。

Hoechst 是一种可以穿透细胞膜的膜通透性荧光染料，在嵌入双链 DNA 后释放蓝色荧光，故正常细胞和中早期凋亡细胞均可被 Hoechst 着色，正常细胞核 Hoechst 染色的形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒，而凋亡细胞的细胞核由于浓集而呈亮蓝色，或核呈分叶，碎片状。凋亡的细胞核染色增强，荧光更为明亮，呈圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相

单细胞铺板是将细胞培养板的每个孔中预先加入适量完全培养基，充分晃动使培养基浸润整个孔底，随后滴加重悬好的细胞悬液，充分摇晃混匀，将细胞分散，不抱团也不过分空荡。

小鼠腹腔巨噬细胞培可以：（1）吞噬与清除异物；（2）分泌生物活性物质；（3）对仿生全降解材料，降解后的无机产物与生命过程中有机物的合成作用。

细胞铺板技术是细胞的常见又必须的实验操作，在细胞计数、培养、免疫荧光等实验操作中必不可少。根据实验目的将一定浓度的细胞稀释液无污染地接种到细胞计数板中，方便进行下一步操作。

人子宫内膜是一个高度再生的组织，这种巨大的再生能力被认为与人类子宫内膜干细胞有直接关系。子宫内膜干细胞分类较为多样化，包括子宫内膜细胞侧群（side population，SP）、子宫内膜间充质干细胞、月经血来源的干细胞等。子宫内膜间充质干细胞（enMSCs）是一类具有自我更新能力、分化潜力、低免疫原性、低致瘤性等生物学特性的新型成体干细胞。

肿瘤干细胞 （CSC） 是指肿瘤内不仅具有自我更新能力还拥有较强侵袭迁移能力的那一小部分细胞，常常在化疗治疗后驱动肿瘤恶变和复发，与肿瘤的存活、增殖、转移和复发密切相关。传统上，肿瘤干细胞会从癌细胞系和肿瘤活检组织中分离出来，并在三维肿瘤球状体悬浮培养物中生长，成球能力是肿瘤干细胞体外鉴定的一个重要方法，目前肿瘤细胞的成球实验（成球大小及数目）是衡量肿瘤细胞干性的主要手段。判断单个细胞在适宜的条件

内皮屏障功能的变化可调控血管向组织的渗漏，以维持稳态。内皮细胞通透性改变在多种疾病的病理生理过程中具有重要的意义，目前已建立了一系列体内外内皮细胞屏障通透性的检测方法。

荧光共振能量转移（FRET）

MTT 法对细胞生长状况的检测实验是通过 MTT（化学名称为 3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐，商品名为噻唑蓝）对细胞生长检测的常用方法。该法以其灵敏性高、重复性好、操作简便、经济安全，而得到广泛应用。

细胞迁移是指细胞在外界信号的作用下从一个位置（区域）移动到另一个位置（区域）的过程，这个过程在生物体内发挥着非常重要的生理和病理学作用，比如损伤修复、肿瘤转移、免疫细胞的迁移、组织修复等。常用的细胞迁移实验方法是Transwell实验。

免疫荧光技术是指将抗原抗体反应和荧光标记技术联合使用以鉴定阳性杂交瘤细胞株的方法。

由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养

恶性肿瘤向邻近的组织侵犯称为侵袭。检测肿瘤侵袭能力是判断肿瘤转移能力的一种方法。

细胞粘附，指的是单个细胞粘附到另一个细胞或其他一些无生命体表面的能力，比如，细胞外基质。一旦细胞黏附发生异常，就会出现严重的病理变化，包括肿瘤的转移、浸润和抵抗凋亡等，本实验通过检测细胞粘附来探究细胞的转移能力。

钙离子在很多生理活动中都发挥着重要作用，细胞荧光钙离子成像技术是利用钙离子指示剂将细胞内钙离子浓度变化转化为荧光信号，从而使细胞电活动转化为可记录的光信号的成像技术。肠神经胶质细胞的活动与钙离子密切相关，利用钙离子指示剂监测神经胶质细胞的活动就显得尤为重要。钙离子荧光指示剂在未结合钙离子前几乎无荧光，与钙离子结合后，荧光强度显著增强。