细胞 DNA 损伤检测

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2023-07-22

合作专家 | 杨晶晶硕士

公共卫生福建医科大学

审核专家 | 孔旭博士

生物学厦门大学

简介

暂无

原理

细胞 DNA 链断裂时，DNA 的超螺旋结构受到破坏，在中性条件时，DNA 片段可进入凝胶发生迁移，而在碱处理和碱性电解质的作用下，DNA 发生解螺旋，损伤的 DNA 断链及片段被释放出来，由于这些 DNA 的分子量很小，所以在电泳过程中会离开核 DNA 向阳极移动，形成彗星状的拖尾图像，而未损伤的 DNA 部分停留在原位，染色后成圆形荧光团。

应用

评价单个细胞的 DNA 损伤（各种因素的生物反应、肿瘤的研究治疗预测）。

来源：

操作方法

单细胞凝胶电泳实验

1、单细胞悬液制备用胰酶将细胞消化至离心管中并进行细胞计数，用 PBS 调节细胞密度至 105~106 个/ml。2、制胶第一层使用 80 μl 0.5% 正常熔点琼脂糖滴到预热的载玻片上，迅速盖上干净的盖玻片，4 ℃ 放置 10 min 使其凝固。第二层是低熔点琼脂糖与细胞的混合液，取 10 μl 含 10000 个细胞的 PBS 和 75 μl 0.5% 低熔点琼脂糖在 37 ℃ 混匀，然后轻