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MTT 法检测细胞毒性与增殖

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

简介

MTT 法对细胞生长状况的检测实验是通过 MTT(化学名称为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名为噻唑蓝)对细胞生长检测的常用方法。该法以其灵敏性高、重复性好、操作简便、经济安全,而得到广泛应用。

原理

MTT 法对细胞生长状况的检测实验的基本原理是利用 MTT 的可接受氢原子而发生显色反应的特点。活细胞中的线粒体具有琥珀酸脱氢酶,能够使外源性的 MTT 还原为难溶性的蓝紫色结晶物,而死细胞缺乏线粒体活性,因此无此活性。

 

蓝紫色结晶物可以溶解在二甲基亚砜中,应用酶标仪在 490 nm 波长可以检测其光吸收值,并根据吸收值的高低判断细胞数量。在一定数量的细胞范围内,吸收值与细胞数目成正比。近年的研究证明蓝紫色结晶物最佳吸收光波为 570 nm。

来源:丁香实验团队

操作方法

MTT 法检测细胞毒性与增殖实验

通过 MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名为噻唑蓝)检测细胞生长、细胞毒性、细胞增殖的常用方法。

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