🔥 Hoechst 染色实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2023-06-15

合作专家 | 郭新容硕士

临床医学中南大学

审核专家 | 聂壹峰博士

纳米生物医学中国科学院大学

简介

Hoechst 是一种可以穿透细胞膜的膜通透性荧光染料，在嵌入双链 DNA 后释放蓝色荧光，故正常细胞和中早期凋亡细胞均可被 Hoechst 着色，正常细胞核 Hoechst 染色的形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒，而凋亡细胞的细胞核由于浓集而呈亮蓝色，或核呈分叶，碎片状。凋亡的细胞核染色增强，荧光更为明亮，呈圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异，很易区别判别。

来源：丁香实验

操作方法

Hoechst 染色实验

1. 用水按 1：500 稀释 1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度 2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中，置室温 2 min。2. 室温下，在水中洗 2 min，晾干。3. 在 42℃ 至 55℃ 烘箱中，烘烤玻片 30~60 min，取出置室温。4. 用 0.5 g/ml 加拿大香柏油为介质，加上盖玻片，将玻片置室温干燥 2 天。5. 用 Hoechst 落射荧光镜

基本方案

1. 用水按1：500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中，置室温2 min。 2. 室温下，在水中洗2 min，晾干。 3. 在42℃至55℃烘箱中，烘烤玻片30~60 min，取出置室温。 4. 用0.5 g/ml 加拿大香柏油为介质，加上盖玻片，将玻片置室温干燥2天。