Hoechst 染色实验

1. 用水按 1：500 稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中，置室温2 min。

2. 室温下，在水中洗2 min，晾干。

3. 在 42℃ 至 55℃ 烘箱中，烘烤玻片 30~60 min，取出置室温。

4. 用 0.5 g/ml 加拿大香柏油为介质，加上盖玻片，将玻片置室温干燥 2 天。

5. 用 Hoechst 落射荧光镜头观察细胞核，用红色滤光片盖住光源并同时以暗视场观察银粒。银粒将显示红色且与显示蓝色荧光的细胞核形成鲜明对比。如欲照像，可对细胞核和银色的颗粒进行二次曝光。

【材料】细胞

【试剂】Hoechst染料 二甲基亚砜染料 二苯亚胺 甲基水杨酸；

【仪器】荧光显微镜 水浴锅 烘箱 培养箱

1. 用水按 1：500 稀释 1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度 2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中，置室温 2 min。

2. 室温下，在水中洗 2 min，晾干。

3. 在 42℃ 至 55℃ 烘箱中，烘烤玻片 30~60 min，取出置室温。

4. 用 0.5 g/ml 加拿大香柏油为介质，加上盖玻片，将玻片置室温干燥 2 天。

5. 用 Hoechst 落射荧光镜头观察细胞核，用红色滤光片盖住光源并同时以暗视场观察银粒。银粒将显示红色且与显示蓝色荧光的细胞核形成鲜明对比。如欲照像，可对细胞核和银色的颗粒进行二次曝光。

1. 勿用 Permaunt，因在观察细胞核时会出现自发突光，加拿大香柏油能很好地显现石蜡切片并在紫外照射下不发荧光，Gelvatol 可用于冰冻切片，但不应用于石蜡切片，因其不能显现组织成分。