内参就是内部参照,一般是指管家基因编码表达的蛋白,它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照参。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,保证实验结果的准确性。 此外,内参可以作为空白对照,还可以检测蛋白转膜情况是否完全、整个 WB 显色发光体系是否正常。内参抗体种类很多,比如 β-Actin、β-Tubulin、GAPDH 等,下面简单介绍下如何选择内参。 一、目的蛋白分子量 选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白
在辛辛苦苦进行了表达和纯化目的蛋白后,我们不免会面临另一个问题:如何储存纯化后的蛋白呢?如果不加注意,就会有前功尽弃的可能。 首先,储存方法的选择取决于蛋白质的稳定性,以及后续实验使用蛋白质的时间和用途。储存时需要避免接近蛋白质稳定极限的储存条件(例如极端 pH 或者接近蛋白质等电点的 pH)。 其次,避免添加会干扰后续实验的成分。 保存方法 1. 短期保存(24 小时内) 大多数的蛋白质可以保存在 4°C。 2. 在 4°C 超过 24 小时 需要考虑对蛋白样品灭菌过滤(使用
,Piezo2 直接介导了我们的触觉感知,而 Piezo2 的突变或者缺失,则会引发明显的触觉缺陷,而且患者对震动、触碰的敏感性会显著降低。 此前,有研究发现 Piezo2 的触觉感应蛋白不仅存在于手指中,而且还存在于肠道中。更加有意思的是,最近发现 Piezo2 似乎在机体便秘发生过程中扮演着重要角色。 近日,来自福林德斯大学等机构的研究人员在 Gastroenterology 杂志发表了题为 Diminished Piezo2-Dependent Tactile Sensitivity