用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

GST 融合蛋白作为在细菌中表达的重组蛋白，从它们被介绍以来，已用于成千上万个研究项目中（Smith and johnson 1988)。它们常常被用于制备抗体，这些抗体可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用以及分析生化反应。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

材料缓冲液和溶液将缓冲液稀释到适当浓度。碱性缓冲液 20 mmol/L HEPES(pH7.5) 50 mmol/LKCl 10 mmol/LMgCl2 1 mmol/L 二硫苏糖醇 0.1%NP-40 封闭缓冲液 5% 脱脂奶粉于碱性缓冲液中相互作用缓冲液 1% 脱脂奶粉于碱性缓冲液中 2xPK 缓冲液 100 mmol/LKPO4(英文版原书如此—译者注） 20 mmol/L