Eason老歌迷
有几种常规方法 。我比较习惯用的是免疫共沉淀Co-Ip,是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础,用于确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时,细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。传统的Co-IP方法通常是用能够与琼脂糖珠上偶联的protein A特异性结合的抗体免疫沉淀A蛋白质,那么与A蛋白质在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来,以此来验证预测的蛋白质是否具有相互作用。
balalaLy
找下游的互作蛋白,过表达或敲低目的蛋白后收集细胞做质谱或组学。
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