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科研学霸天团,48小时有问必答
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大鼠尾静脉取血检测胰岛素
loveliufudan
进行大鼠尾静脉取血检测胰岛素时,一般需要抽取一定量的血液才能进行检测。通常,抽取的血液量应该是大鼠体重的1%-3%,也就是说,对于体重为200-300g的大鼠,每次取血量应该在2-6mL之间。需要注意的是,在进行尾静脉取血时,应该采取正确的操作步骤和方法,以避免对大鼠造成不必要的伤害。同时,也应该注意血样采集的时间,以避免影响胰岛素的测定结果。在进行胰岛素的ELISA检测时,需要使用专门的胰岛素试
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Dkk1
sswei
DKK1是Wnt/β-catenin信号通路的可溶性抑制剂,它在骨骼发育和骨代谢的过程中都发挥着至关重要的作用。
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淋巴细胞分离计数实验计数偏低的原因!!
天一湖医者
可能原因,温度是否没有调好,温度直接影响到Ficoll的比重和分离效果。在Ficoll上加入稀释外周血时,应缓慢加,以免冲散界面。Ficoll应适量,外周血应充分稀释。
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求助关于Jurkat细胞的问题。
sswei
Jurkat细胞 如果用慢病毒做成car-t,不具有永生能力。如果用慢病毒转染,转染前可使用CD3/CD28抗体进行激活。慢病毒转染后,可以对肿瘤细胞进行杀伤,CD4比CD8的杀伤作用差些。
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肿瘤干细胞传代
loveliufudan
传代和扩培肿瘤球(tumor spheres)的方法可以因实验目的、肿瘤类型和细胞培养条件等而异,但以下是一般的操作步骤:用PBS或无酶胰消化液将肿瘤球收集起来,放到50 ml离心管中,然后离心洗涤2-3次,去除细胞碎片和培养基残留物。将肿瘤球重悬于新的培养基(如肿瘤球培养基、serum-free medium等),一般是将每个肿瘤球接种到新的96孔或24孔培养板中。等待肿瘤球重新附着和生长。通常
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SMD1168和GS115感受态从-80拿出来在冰上化了半个小时,怎么看是否
loveliufudan
在半个小时的冰上解冻之后,如果上层已经稍微澄清,这可能意味着感受态已经成功地被解开。但是,如果下层仍然是白色浑浊的,这可能意味着它们还没有完全解开。在这种情况下,您可以轻轻地摇晃样品管,以帮助混合液体并促进解开。如果您想进一步确认细胞悬液是否已经成功地解开成为可测量的液态状态,您可以尝试进行进一步的实验,例如使用比色法或荧光检测法检测其蛋白质含量或活性等指标。
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求胶原蛋白免疫荧光染色方法
毛利小五郎的徒弟
胶原蛋白免疫荧光染色方法:1.天青石蓝液的配制:天青石蓝(Celestin blue B) 1.25g 硫酸铁铵(ferric ammonium sulfate)1.25g蒸馏水 200ml甘油(glycerin) 30ml将前两者溶于蒸馏水中,然后煮沸,冷却后过滤,再加入甘油和麝香草酚。Mayer氏苏木素的配制苏木素 0.1g 蒸馏水 100ml钾明矾(Potassium alum) 5g柠檬酸
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请问Slc7a5 fl/fl 与Col2a-Cre;Slc7a5fl/fl有什么区别,谢谢🙏
毛利小五郎的徒弟
SLC7A5fl是一种能将胺基酸运送入细胞内的细胞表面蛋白,而col2a-cre是介导表达的基因。
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请问细胞迁移不均匀是怎么回事呢?
毛利小五郎的徒弟
细胞数量有点多,迁移不均匀首先考虑迁移胶不均质的问题
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hepg2细胞做迁移实验transwell穿不过去
loveliufudan
在您的实验中,由于细胞大小超过了孔径大小,这可能是导致细胞无法穿过半透膜的原因之一。为了确定是否是孔径大小的问题,您可以尝试使用具有更大孔径的Transwell小室进行实验。您还可以尝试使用其他细胞类型,看看它们是否可以穿过半透膜,以确认实验方法是否正确。另外,您需要确保在实验过程中使用适当的实验条件,例如适当的培养基、细胞密度和处理时间。如果有必要,您可以尝试优化实验条件,以提高细胞迁移的效率。
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DIO染料标记细胞膜
毛利小五郎的徒弟
把荧光材料用抗体孵育然后和细胞膜结合
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有核红细胞裂解液
毛利小五郎的徒弟
一般有核红细胞需要等成熟后再进行裂解。选择常规的红细胞裂解液就可以
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Annexin V-FITC/PI染色出现假阳性?
sswei
在凋亡实验中,经常会出现假阳性或与预期结果不符的情况,可能的原因有补偿调节不当、细胞浓度过高、消化过度、药物干扰、药物处理时间过长、样本自身问题等多个方面,过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤,造成假阳性。
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confocal封片不平导致细胞不在同一个平面上,无法聚焦是什么原因导致的?
毛利小五郎的徒弟
可能的原因有1.标本凹凸不平2.标本消化不足3.封片不平
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细胞分选
毛利小五郎的徒弟
可以用流式实验做GABA分选,注意做好分选标签。
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雪旺细胞
毛利小五郎的徒弟
分离:通过常规的热酶消化法、组织块法以及冷酶消化对雪旺细胞进行分离培养:雪旺细胞培养通过双差速贴壁和有丝分裂抑制剂阿糖胞苷(Ara-C),去除或抑制成纤维细胞生长,通过成纤维细胞生长因子(bFGF)使雪旺细胞得到进一步增殖.
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细胞成团,细胞出芽实验!!
毛利小五郎的徒弟
我的做法是离心1000rpm,五分钟,过程尽量避免摇动离心筒,如果细胞少的话,可留少许上清,基本不会丢失细胞.如果是吸走培养液的话,再加新的,就等于传代了
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求助,人脐带间充质干细胞的提取方法,酶解法好几次了都不成功
huarenqiang5
1.制备:使用生理盐水充分洗涤脐带,并剪成小段。去除动脉和静脉,撕取华通胶至少8ml。充分剪碎后平分至4瓶已加25ml完全培养基的175cm2培养瓶中。静置培养7天。第8天根据生长情况,进行换液、传代。2.换液:根据细胞生长情况与培养基颜色决定全量换液或半量换液。用去头移液管吸弃半量或全量旧培养基,更换移液管,于培养瓶的非细胞培养面缓慢加入等量新培养基。3.传代:每瓶加0.25%胰酶3ml,待细
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怎样让给药后的细胞恢复状态
loveliufudan
在您的实验中,给细胞低浓度的顺铂处理24小时后撤药,但细胞不能恢复之前的状态,这可能是由于顺铂引起的细胞毒性过大,细胞无法恢复。要让细胞恢复状态,您可以尝试以下方法:适当降低顺铂的浓度:如果细胞对顺铂的毒性过大,可以尝试适当降低顺铂的浓度,或者缩短处理时间,以减少对细胞的影响。加入细胞生长因子:细胞生长因子可以促进细胞生长和分裂,有助于加速细胞恢复。您可以根据实验需求选择适当的细胞生长因子加入到培
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求助 请问癌细胞分裂期有多长时间啊?0.5-2h?
loveliufudan
癌细胞分裂期的时间可以因细胞类型和生长条件而异。一般来说,癌细胞的有丝分裂周期约为 18-24 小时,其中 G2/M 期为 4-6 小时,M 期为 1-2 小时。对于您所做的 H1299 细胞,nocodazole 可以阻止细胞有丝分裂,使大部分细胞停滞在 G2/M 期。如果您想要得到分裂期的细胞,您可以在 nocodazole 处理后等待 1-2 小时,这样细胞应该已经进入 M 期。接着您可以用
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