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小鼠胚胎成纤维细胞(BALB-3T3)做了transwell实验,每个小室5万个细胞,培养24h后,4%多聚甲醛固定30min,结晶紫染色30min。我这个细胞数量是不是有点多啊?
土井挞克树
细胞数量有点多,迁移不均匀首先考虑迁移胶不均质的问题
loveliufudan
5万个细胞每个Transwell小室进行迁移实验是比较常见的实验方法之一,通常可以获得稳定的实验结果。但是具体的细胞数量要根据实验的目的和细胞类型而定。对于BALB-3T3成纤维细胞来说,5万个细胞可能略微有些多,但在实际操作中也不会有太大的问题,只要保证每个小室的细胞数量一致即可。
细胞迁移不均匀可能由多种原因导致,以下是一些可能的原因:
细胞数量不均:如果每个Transwell小室中的细胞数量不均匀,或者在不同的小室中细胞数量不一致,可能会导致细胞迁移不均匀。
细胞粘附不均:在Transwell小室中,细胞需要粘附在孔板底部才能进行迁移。如果细胞在不同位置粘附的程度不同,可能会导致迁移的不均匀性。
细胞生长状态不同:如果在Transwell小室中培养的细胞生长状态不同,例如有些细胞已经停滞生长而有些细胞处于快速生长阶段,那么细胞迁移的速度和程度也可能会不同。
孔径大小不同:Transwell小室的上下两个室之间的孔径大小会影响细胞的迁移速度和程度。如果不同的小室中孔径大小不一致,可能会导致细胞迁移不均匀。
为了解决这些问题,可以尝试以下方法:
保证每个Transwell小室中细胞数量一致。
在Transwell小室中涂覆胶原或其他有助于细胞粘附的物质,以提高细胞的粘附能力。
确保Transwell小室中的细胞都处于相似的生长状态。
使用孔径大小一致的Transwell小室。
sswei
transwell实验每个小室5万个,这个数量差不多。
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