Transwell实验下室可见大量细胞穿出 但是染色却看不到明显的细胞的原因

有可能是小室的膜孔径大于细胞直径，导致细胞漏下去了。

下室有细胞，如果指的是下室培养基里可见大量细胞，那么有可能是小室的膜孔径大于细胞直径，导致细胞漏下去了，可以查一下细胞以及孔径大小。

如果指的是膜下面可见细胞附着但染色看不到，有可能是PBS漂洗过程中导致细胞丢失，可以吸掉血清直接固定看看。

以上仅供参考。

有以下几个可能的原因：

1. 细胞形态问题：在穿透Transwell孔隙过程中，细胞可能会改变形态，如拉伸、扁平化或脱落。这可能导致细胞在染色后难以准确地观察或识别。

2. 细胞附着问题：染色前的处理步骤可能导致细胞在玻片上不均匀附着或固定不牢，从而使细胞在染色后易于脱落。这可能导致细胞在染色后无法被保留在玻片上。

3. 染色方法问题：选择的染色方法可能不适合观察细胞穿透情况。不同的染色方法对细胞结构和成分有不同的特异性，可能需要尝试不同的染色方法来准确观察穿透细胞。

4. 染色剂浓度问题：染色剂的浓度可能需要进行优化，以确保对细胞的染色充分而不会对细胞结构造成伤害。染色剂浓度过高或过低都可能导致无法明显观察到细胞。