huarenqiang5
悬浮细胞可以做transwell实验,具体步骤如下:
(1)悬浮细胞最好在前一天进行饥饿处理(即无血清培养基过夜培养,以便增强细胞迁移能力);
(2)实验当天,收集细胞,离心去上清,用无血清培养基重悬,计数;
(3)每组细胞的配制:每组 3 复孔。按照每孔 10^5 个细胞 / 200 μl 的量配制 4 个复孔的用量(多配 1 孔),即 4×10^5 个细胞 / 800 μl;
(4)transwell 下室加入 700-800 μl 的含 10% 胎牛血清的培养基,上室加入(3)中配制好的 100 μl 细胞;
(5)细胞培养箱中培养 24-48 小时,具体需要预实验摸索下,每种细胞迁移能力不一致;
(6)固定,染色,显微镜下拍照,计数,统计。
毛利小五郎的徒弟
材料与仪器
细胞样品、transwell 小室;
步骤
(1)悬浮细胞最好在前一天进行饥饿处理(即无血清培养基过夜培养,以便增强细胞迁移能力);
(2)实验当天,收集细胞,离心去上清,用无血清培养基重悬,计数;
(3)每组细胞的配制:每组 3 复孔。按照每孔 10^5 个细胞 / 200 μl 的量配制 4 个复孔的用量(多配 1 孔),即 4×10^5 个细胞 / 800 μl;
(4)transwell 下室加入 700-800 μl 的含 10% 胎牛血清的培养基,上室加入(3)中配制好的 100 μl 细胞;
(5)细胞培养箱中培养 24-48 小时,具体需要预实验摸索下,每种细胞迁移能力不一致;
(6)固定,染色,显微镜下拍照,计数,统计。
balalaLy
跟贴壁细胞大同小异
(1)悬浮细胞最好在前一天进行饥饿处理(即无血清培养基过夜培养,以便增强细胞迁移能力);
(2)实验当天,收集细胞,离心去上清,用无血清培养基重悬,计数;
(3)每组细胞的配制:每组 3 复孔。按照每孔 10^5 个细胞 / 200 μl 的量配制 4 个复孔的用量(多配 1 孔),即 4×10^5 个细胞 / 800 μl;
(4)transwell 下室加入 700-800 μl 的含 10% 胎牛血清的培养基,上室加入(3)中配制好的 100 μl 细胞;
(5)细胞培养箱中培养 24-48 小时,具体需要预实验摸索下,每种细胞迁移能力不一致;
(6)固定,染色,显微镜下拍照,计数,统计。
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