毛利小五郎的徒弟
分离:
通过常规的热酶消化法、组织块法以及冷酶消化对雪旺细胞进行分离
培养:雪旺细胞培养通过双差速贴壁和有丝分裂抑制剂阿糖胞苷(Ara-C),去除或抑制成纤维细胞生长,通过成纤维细胞生长因子(bFGF)使雪旺细胞得到进一步增殖.
loveliufudan
进行雪旺细胞分离培养实验,需要以下基本步骤:
雪旺细胞分离:使用胰酶和EDTA等消化酶对组织样本进行分离,分离出单个细胞。可以根据不同实验的需要,选择不同的分离方法和消化酶浓度。
细胞计数和调整浓度:使用细胞计数器计数细胞,并根据实验需要调整细胞浓度。通常使用Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM)等培养基调整细胞浓度,最终细胞密度通常在1×10^5至1×10^6/ml之间。
细胞培养:将分离的雪旺细胞接种到含有培养基的细胞培养皿中。通常使用DMEM等培养基加入10%胎牛血清(FBS)进行细胞培养,可以在37°C的恒温培养箱中培养细胞。
细胞检测和鉴定:在细胞培养过程中,需要定期观察和检测细胞的生长状态和形态特征,确认是否为雪旺细胞。可以通过显微镜观察细胞形态和免疫组化等方法进行鉴定。
细胞分化:雪旺细胞可以分化为多种不同类型的细胞,如神经元、胶质细胞等。根据不同实验的需要,可以添加适当的分化因子或调整培养条件,促进细胞分化为特定类型的细胞。
sswei
取SD乳鼠坐骨神经及臂丛神经,剪碎至1mm的植块,复合酶消化后进行组织块培养,Ara-C抑制成纤维细胞生长,b-FGF刺激SC增殖,低浓度胰酶快速消化传代进一步纯化雪旺细胞,采用细胞形态学观察、生长曲线测定、S-100蛋白鉴定.培养1、3、5、7天后,相差显微镜下观察SC的生长情况及其形态.