sswei
培养条件应该是在pma(5ng/ml)加5%t细胞上清液存在下用辐射的el4b5。
土井挞克树
培养基 |
1.用免疫细胞培养基(如GT-T551 H3),90%,补加IL2,浓度为0.5U/ml; 2.或者用1640+2mM谷氨酰胺+1mM丙酮酸钠 胎牛血清,10% 补加IL2,浓度为0.5U/ml |
培养条件 |
饱和湿度二氧化碳培养箱: 温度37℃,5%的二氧化碳 |
loveliufudan
B细胞分选成naive B细胞和memory B细胞之后,通常需要进行不同的培养条件。下面是一些常用的培养条件和方法供参考:
Naive B细胞培养条件:
培养基:RPMI 1640培养基
补充物:10% 胎牛血清,100 U/mL 青霉素/100 μg/mL链霉素
生长因子:IL-4、CD40L、IL-21等
在培养过程中,建议每2-3天更换培养基和生长因子,以保持细胞生长状态和维持生长因子的浓度。
Memory B细胞培养条件:
培养基:RPMI 1640培养基
补充物:10% 胎牛血清,100 U/mL 青霉素/100 μg/mL链霉素
生长因子:IL-2、IL-6等
在培养过程中,同样需要每2-3天更换培养基和生长因子,以维持细胞生长状态和维持生长因子的浓度。
对于分选出的B细胞,可以使用磁珠分选法、细胞表面标记法等方法进行分选。具体分选方法根据实验条件和设备可用性不同而异。
需要注意的是,在进行B细胞的分选和培养过程中,需要避免细胞受到不必要的刺激和损伤,以保证细胞的健康状态和实验结果的准确性。同时,建议对细胞进行严格的品质控制和质量检测,以保证实验结果的可靠性。