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求助b细胞培养

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妖精69

求助b细胞分选成naive b cell和memory b cell 后的培养条件以及方法。因为我做的实验

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3 个回答

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sswei

有帮助

培养条件应该是在pma(5ng/ml)加5%t细胞上清液存在下用辐射的el4b5。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

培养基

1.用免疫细胞培养基(如GT-T551 H3),90%,补加IL2,浓度为0.5U/ml;

2.或者用1640+2mM谷氨酰胺+1mM丙酮酸钠

胎牛血清,10%

补加IL2,浓度为0.5U/ml

培养条件

饱和湿度二氧化碳培养箱:

温度37℃,5%的二氧化碳

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loveliufudan

有帮助

B细胞分选成naive B细胞和memory B细胞之后,通常需要进行不同的培养条件。下面是一些常用的培养条件和方法供参考:

Naive B细胞培养条件:

培养基:RPMI 1640培养基

补充物:10% 胎牛血清,100 U/mL 青霉素/100 μg/mL链霉素

生长因子:IL-4、CD40L、IL-21等

在培养过程中,建议每2-3天更换培养基和生长因子,以保持细胞生长状态和维持生长因子的浓度。

Memory B细胞培养条件:

培养基:RPMI 1640培养基

补充物:10% 胎牛血清,100 U/mL 青霉素/100 μg/mL链霉素

生长因子:IL-2、IL-6等

在培养过程中,同样需要每2-3天更换培养基和生长因子,以维持细胞生长状态和维持生长因子的浓度。

对于分选出的B细胞,可以使用磁珠分选法、细胞表面标记法等方法进行分选。具体分选方法根据实验条件和设备可用性不同而异。

需要注意的是,在进行B细胞的分选和培养过程中,需要避免细胞受到不必要的刺激和损伤,以保证细胞的健康状态和实验结果的准确性。同时,建议对细胞进行严格的品质控制和质量检测,以保证实验结果的可靠性。

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