细菌与细胞共培养难题
小容儿07
实验需要用细菌与细胞共培养，不知道有没有方向类似的友友可以交流一下。目前90%的文献都说该细菌促进肿瘤细胞增殖和迁移，可是做了MOI梯度均提示共培养后细胞状态非常差，抑制迁移，和文献结果相反，不知道共培养的步骤哪里出问题了。细菌加到细胞里，不就相当于细胞污染了吗，为啥还能促进迁移和增殖呢？有没有做过相关实验的伙伴儿可以指点一下呢？谢谢！
4 个回答
coconut27
请问楼主解决了吗？求一个protocol
dxyc42u
考虑是细胞状态本身不好，加了细菌后细胞状态就更差了
loveliufudan
共培养细菌和细胞的实验设计和结果可能受多种因素的影响。以下是一些可能导致您的实验结果与文献不符的原因以及解决方法：
1. 细菌菌株选择：不同的细菌菌株可能具有不同的影响力。确保您选择的细菌菌株与文献中使用的菌株一致，以保证实验的可比性。
2. 细菌培养条件：细菌的培养条件（如培养基、培养温度、培养时间等）可能会对细胞产生不同的影响。确保您在培养细菌时使用适当的培养条件，并与文献进行比较。
3. 细菌浓度和共培养时间：共培养细菌和细胞的浓度和时间应根据实验需求和细菌的特性进行优化。过高的浓度或过长的共培养时间可能导致细胞受到过多的细菌刺激而表现出异常状态。
4. 实验控制组的设置：确保您在实验中设置适当的对照组，比如只有细菌、只有细胞以及无细菌无细胞的对照组。这样可以帮助您确定是否存在细菌对细胞迁移和增殖的促进效应。
5. 检测方法的选择：确保您使用准确、敏感的方法来评估细胞的迁移和增殖情况。常用的方法包括细胞计数、划痕实验、Transwell迁移实验等。根据您的研究目的，选择适合的检测方法。
小容儿07
我估计应该是我们划痕实验的方法有点儿问题，目前我们都是划痕清洗后，将菌加入细胞里共培养不同的时间梯度，检测是否会促迁移。下次准备改进喂将菌和细胞先共培养不同的时间梯度后，再划痕，清洗，观察各组不同时间点的迁移面积。不知这样是否可行，打算试一试。
土井挞克树
这和细菌浓度有关，细菌浓度太高就相当于污染，少量是可以起到促进作用的
小容儿07
我们设置了不同的MOI值，所以是根据细胞量来计算菌液数，摸MOI值条件的，所以是一个浓度梯度都试了，结果额度不太理想。
