【求助】细菌双杂交pBT酶切难题
丁香园论坛
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pBT载体多克隆位点酶切:见附件
由于酶切位点离得近,用NotI 和 XhoI 是否能同时进行双酶切,还是需要分部酶切?
另外,分别含 NotI和XhoI酶切位点的修饰引物一般需要几个保护碱基?
![](http://img.dxycdn.com/upload/2010/09/05/41143571.jpg)
由于酶切位点离得近,用NotI 和 XhoI 是否能同时进行双酶切,还是需要分部酶切?
另外,分别含 NotI和XhoI酶切位点的修饰引物一般需要几个保护碱基?
![](http://img.dxycdn.com/upload/2010/09/05/41143571.jpg)
期待各位朋友为我答疑解惑,最近实验很郁闷,很悲剧!
不知道你用的什么公司的酶进行酶切的!这边有个网站是对酶切和保护碱基的设计的!比较有效!你参考下!http://www.neb.com/nebecomm/tech_reference/restriction_enzymes/buffer_activity_restriction_enzymes.asp
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