土井挞克树
可以用流式实验做GABA分选,注意做好分选标签。
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分选GABA神经元细胞可以使用多种技术,包括荧光活细胞排序(FACS)和磁珠分选。以下是一些可能有用的提示和技巧:
标记GABA神经元细胞:使用标记GABA神经元细胞的方法,例如使用GAD67-GFP小鼠或转染GAD2-GFP表达质粒。这些标记可以帮助您确定要分选的细胞群体。
准备细胞悬液:将脑组织分离并用适当的缓冲液制备单细胞悬液。最好选择含有酶的缓冲液,如Papain或Trypsin,这样可以更容易地消化组织并制备单细胞悬液。
FACS:如果使用FACS,您需要将细胞悬液注入到FACS仪器中,并根据您选择的标记(例如GFP)选择适当的激发波长和探测器。您可以设置筛选门(例如,以GFP强度为基础),并将筛选的细胞分选到收集管中。
磁珠分选:如果使用磁珠分选,您需要将适当的抗体针对GABA神经元细胞表面标记,并将其与磁珠结合。将细胞悬液与磁珠混合,并将混合物通过磁珠分选仪器。磁珠与GABA神经元细胞结合,而其他细胞则被去除。最后,用缓冲液洗涤细胞,将它们从磁珠中解离。
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可利用微流控技术的方法来进行分选。
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