材料与仪器
【仪器】xCELLigence或iCELLigence 细胞功能分析仪及对应的E-Plate检测板、超净工作台、CO2培养箱、低速离心机、移液器、细胞计数板、光学显微镜。
步骤
1、向E-Plate检测板中加入培养基并测定背景阻抗值。
2、收集对数期细胞并计数,调整细胞悬液浓度,向E-Plate检测板中加入一定 体积的细胞,室温超净台内放置30min。
3、将加入细胞的E-Plate检测板放入检测台上(检测台预先放入培养箱中), 进行实时动态的细胞增殖检测。
4、过夜检测后,向各培养孔中加入配制好的梯度药物并继续进行实时动态检测, 即可获得化合物介导的细胞效应曲线及不同时间段IC50值。
注意事项
可通过对细胞增殖及毒性的实时检测,确定细胞变化的关键时间点,检测后的细胞样品可用于细胞形态学观察、Western blot、Elisa、细胞凋亡及免疫荧光等细胞检测实验。
来源:丁香实验