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MACSQuant Tyto 细胞分选仪助力开发 COVID-19 新疗法

美天旎

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丹麦奥胡斯大学医院传染病研究部门,Dr. Mariane H. Schleimann 与其团队现在正大量参与对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的研究。正如全世界的情况一样,迫切需要找到针对 COVID-19 有效的疫苗,以及治疗方法,这激发了许多基础研究、转化和临床组织共同投入到 COVID-19 研究中。

以下是由美天旎生物技术与 Dr. Mariane H. Schleimann 根据其对 COVID-19 研究进行的访谈:

1. Dr. Mariane H. Schleimann 团队在奥胡斯大学医院是如何设立的?

我们的部门本质上是医院和大学的结合,医学博士和博士生,博士后和其他科学家组成了团队的一部分。总的来说,我们由三个独立但紧密相连的群体组成,总共约有 40 人,他们每天都在研究传染病和临床医学。目前,其中一个目标是发现中和抗体用于 COVID-19 疗法,这也是我们在常规 HIV 研究中尝试使用的疗法;这是一种新的治疗方法,具有很大的潜力。

我们许多研究者进入细胞生物学领域,是为各种疾病努力寻找治疗方法,帮助患者。在医院里,我们更接近了病人:我们得到了患者的实际样本,并直接与他们合作。因为我们如此接近患者与疾病,同时致力于如何治愈它;这种与病人和医生的亲密关系——不仅激励我们继续应对挑战,更是实时地看到我们所做的改变,可对患者有所助益。

图片MACSQuant® Tyto®细胞分选仪基于世界上最快的阀门开合的分选技术,不产生气溶胶和释放任何液滴。

2.你主要使用 MACSQuant® Tyto® 细胞分选仪来分选B细胞吗?

对。当这个仪器为我们演示时,我们实际上计划使用它来从 HIV 阳性患者材料中分选 CD4+T 细胞亚群。然而面对最近的 COVID-19 危机,我们将研究方向转向 SARS-CoV-2,目的是开发一种基于抗体的新治疗方法。

我们计划的工作流程是从 COVID-19 康复患者身上获取血浆,与病毒一起孵育,并测量中和水平如果我们发现很好的中和抗体,我们也会测试他们对 2002 年的非典型肺炎病毒中和疗效。下一步,我们将尝试从那些能同时感染两种病毒的病人身上分离出 B 细胞。

通过这种方式,我们希望获得可以用于治疗的抗体。我们也用它与荧光团结合的刺突蛋白作为诱饵来标记表达和产生 SARS-CoV-2 特异性抗体的 B 细胞。MACSQuant Tyto 细胞分选仪非常适合我们,因为可以将其用于分选浆细胞、记忆 B 细胞或任何目标细胞。关键的一步是从先前感染的病人中分离出 B 细胞。

3. MACSQuant Tyto 细胞分选仪比传统液滴式分选仪提供了额外安全性,但从康复患者中分选B细胞是否更危险?

没有证据表明病毒仍然存在于康复患者的外周血中,但我们不冒任何风险,对待患者样本就像他们仍然被感染一样。这意味着任何类型的常规液滴分选机都完全不能满足我们的需要。

4. 细胞分选过程中如果产生气溶胶,是否不应该冒险?

是的。由于气溶胶的形成,传统液滴式细胞分选必须在生物安全柜或 BSL3 实验室中进行。然而,我们没有用于处理感染性样本和产生气溶胶的 BSL3 实验室设备与细胞分选仪。因此,全封闭的 MACSQuant Tyto 样本舱可以安全地将 COVID-19 患者的样本细胞在 BSL2 甚至 BSL1 实验室进行细胞分选。

图片

细胞分选仅在封闭的无菌的 MACSQuant Tyto 样本舱内进行,系统本身无需液流。

5. 中和试验是如何进行的?

首先,我们使用 MACSQuant Tyto 分离抗原特异性 B 细胞。接下来,我们进行单细胞 DNA 提取,以 PCR 扩增抗体的基因序列,然后用它来构建和复制我们非常感兴趣的抗体。这些抗体随后被用来尝试在 BSL3 条件下中和病毒。

6. 在您的方法中可确定多少有潜力的候选抗体?

首先,我们计划从五位 COVID-19 患者身上提取材料,他们的血浆可以中和病毒并分离出 B 细胞;并经由高通量筛选试验从每位患者提取出可产生抗体 200 个抗原特异性 B 细胞。

7. 你认为 MACSQuant Tyto 细胞分选仪有什么好处,特别是与你目前的 COVID-19 研究有关?

安全性操作是最优先考虑,全封闭的细胞分选环境这是最主要的优势。此外,使用仪器不需要高强度的培训。一旦全部设置好,实验室人员就可以很容易地使用它。

8. MACSQuant Tyto 细胞分选仪是否在 HIV/COVID-19 研究团队之外共享?

目前没有,但我们计划很快更多地利用它在其他研究。我们想邀请研究流感和脊髓灰质炎的同事使用 MACSQuant Tyto。至于大学流式细胞仪平台,他们也正在寻找一个合适的细胞分选仪, MACSQuant Tyto 可推荐作为候选之一。

9. COVID-19 研究中,污染风险是一个 100% 的关注点吗?

是的。在最基本的免疫学/病毒学环境中,通常在体外或离体细胞被感染的任何地方,人们对被感染的细胞感兴趣。因此使用 MACSQuant Tyto 细胞分选仪中对我们的病毒感染研究受益匪浅。

10. 你对与美天旎生物技术合作的总体印象如何?

非常专业。美天旎生物技术的同事们很了解我们的需要,并能提出很好的建议。我们与他们合作多年,在这个特殊的案例中,在 MACSQuant Tyto 演示并获得经费后,很快便进行了仪器采购及安装。后续培训与技术支持都很到位,合作非常愉快。

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