Annexin V-FITC/PI染色出现假阳性？

在凋亡实验中，经常会出现假阳性或与预期结果不符的情况，可能的原因有补偿调节不当、细胞浓度过高、消化过度、药物干扰、药物处理时间过长、样本自身问题等多个方面，过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤，造成假阳性。

减少消化时间后再重新做一次就会好了

Annexin V-FITC/P染色出现假阳性可能与多种因素有关，如细胞死亡的方式、细胞密度、处理时间等等。在您的实验中，造成假阳性的原因可能是消化的时间过长，导致过多的细胞死亡，从而增加了背景信号。此外，还有可能是您的样本中存在非特异性的FITC结合蛋白，导致假阳性信号。

为了避免这种情况，建议您在消化时控制好消化时间和酶的浓度，避免过度消化。此外，您可以尝试使用其他方法，如胰蛋白酶与EDTA联合消化、低温消化等，以减少背景信号。在染色前，您可以进行细胞计数和体积调整，控制好细胞密度，避免过高或过低的细胞密度造成假阳性结果。最后，您可以尝试使用其他荧光染料或双染法，以便进行对照和确定是否存在假阳性信号。