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流式细胞仪标本制备
流式细胞仪标本制备可应用于:(1)诊断细胞表面标志物;(2)免疫学研究;(3)分离纯化某一群或亚群细胞。
实验概况收录 2 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
与分析Ficoll分离后的单个核细胞相比,本方法分析全血细胞,因而所用时间短,需要的样本量少,并且可以避免Ficoll分离后的细胞,尤 其 是 B 细胞的损失。作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
流式细胞仪
1.  减少非特异荧光染色(1)细胞的活性和状态:流式细胞仪不但可探测细胞表面的荧光,也可探测细胞内的荧光。因此,如果要检测细胞表面的分子,一定要保证细胞的活性,还应尽可能保持细胞静止,通常在4度进行操作。否则,荧光抗体进入死细胞内,会产生非特异结果。(2)封闭抗体的应用是必不可少的,因为大多数的免疫细胞表面都表达有Fc-R。细胞与抗体相互作用后,一定要用FACS缓冲液洗2~3次,以除去游离的抗体。2.  单染色时以FACS最常用,FITC标记抗体荧光比较稳定而且价格合适。3.  
操作方法所属实验:流式细胞术
流式细胞仪测定法
周期及凋亡率,请教几个问题: Q:(1)所用的RNAs酶用什么配制呢?用PBS配吗? A:RNaseA用PBS配制没有问题,但是注意要沸水浴去除DNase的活性。 Q:(2)测细胞周期和凋亡率时都要用RNAs酶,可以一起检测吗? A:用流式细胞仪测定时细胞周期和凋亡率是同时测定的,不用担心。 Q:(3)Triton-x-100是固定剂吧,用了70%的冷乙醇(是4℃吗?),是不是就不用Triton-x-100固定了? A:Triton X-100是起透化作用的,不是固定剂,可以用75%的乙醇于-20度固定
操作方法所属实验:细胞周期测定实验
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流式细胞仪的原理及应用举例

简介免疫细胞是一组不均一的细胞群体。各种特定的细胞群其细胞表面表达有各自特异的表面标志分子,利用这些特异的表面标志,可以鉴定、分离和纯化相应的细胞群。随着单克隆抗体技术的诞生和免疫标记技术(特别是荧光标记技术)的发展,以及计算机科学的应用,使利用仪器的方法检测特异的细胞膜表面分子成为可能。本章介绍的荧光激活细胞分类技术就是采用单克隆抗体技术和免疫荧光标记技术,并结合光学检测和计算机分析技术而产生的鉴定和分离特定细胞亚群的技术。原理流式细胞仪(flowcytometer)是一种能够探测和计数

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FACSAria流式细胞仪无菌分选的基本流程

一、环境和液流的消毒 1、准备足量的无菌1×PBS(3L左右)和去离子水(10L左右)。PBS和去离子水可高压灭菌,sheath桶和装DI水的5L小桶依次用75% 医用酒精和无菌去离子水各涮洗三次,然后将无菌PBS和去离子水分别注入相应桶内即可。 2、房间在分选前紫外灯照射15-20分钟;用1:50新洁尔灭拖地;用75% 医用酒精擦拭工作台和收集架;用75% 医用酒精喷洒分选细胞收集区和上样区。 二、开机和管道的消毒 1、将Sheath液换为活性氯浓度为0.5% 的次氯酸钠溶液(不要

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细胞凋亡:流式细胞仪检测实验
来源:《精编分子生物学实验指南》第五版
实验概况收录 3 操作方法 · 3 相关问答 · 3 相关文章
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可应用于:(1)鉴定细胞凋亡形态;(2)准确的进行凋亡细胞的计数;(3)进行特异的定性分析和定量分析。
实验概况收录 3 操作方法 · 2 相关问答 · 3 相关文章
流式细胞仪标本的制备的具体步骤是什么?
(或兔)抗鼠荧光标记物,充分振摇,置于 4℃ 30 min;(5)用洗涤液洗涤 2 次,每次加液 2 ml 左右,1000 rpm 离心 5 min;(6)加 1 ml 固定液制成流式细胞仪标本。
操作方法所属实验:流式细胞仪标本制备
流式细胞仪检测细胞周期
流式细胞仪(flow cytometer,FCM)又称荧光激活细胞分类仪(fluorescence activited cell sortor,FACS),由光学系统、电子控制系统以及计算机分析系统三个部分组成。
操作方法所属实验:细胞周期分析
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流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是caspase家族激活,磷脂酰丝氨酸外翻,这时细胞的形态已经发生了改变,可以看到细胞变小,胞核皱缩;最后是细胞内DNA断裂,形成凋亡小体。在凋亡发生的各个过程当中,都有相应的流式细胞仪的检测方法,可以采用

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流式细胞仪的工作原理

流式细胞仪的工作原理 流式细胞仪主要由四部分组成:流动室和液流系统,激光源和光学系统,光电管和检测系统,计算机和分析系统。四大系统共同完成信号的产生、转换和传输任务。检测时将待测细胞或微粒制成细胞悬液,进行荧光染色后加入样品管中。以一定压力将待测样品压人流动室,在高压下磷酸缓冲液(鞘液)从鞘液管喷出,鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度,这样,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形流束(鞘流),待测细胞在鞘液包绕下单行排列,依次通过检测区。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦

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流式细胞仪检测细胞内因子
本单元介绍用4 色 荧 光 分 析 CD4+ T 细 胞 内 表 达 IFN-7、 IL-4、 IL- 2 水平的方法(可用于计算T h l 和 T h 2 细胞比例)。作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」
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活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(flow cytometry,FCM)可用于:(1)免疫学的基础研究和临床应用,尤其是结合单克隆抗体技术;(2)在免疫分型、分选、肿瘤细胞的免疫监测;(3)机体免疫状态的监测;(4)免疫细胞的系统发生及特性研究等方面。
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
流式细胞仪法分选法分离纯化 SP 细胞
流式细胞仪法分选法分离纯化 SP 细胞的基本过程可分为如下几步:(一)试剂配制(1)1000xHoechst 33342 储存液(5 mg/ml,-20 ℃ 长期保存)。(2)1000xPI 储存液(2 mg/ml,-20 ℃ 长期保存)。(3)组织保存液的配制 TC199 培养基,100 ml;青霉素(10000 U/ml),4 ml;链霉素 (10000 μg/ml),4 ml。 用 0.22μm 滤器过滤除菌。4 ℃ 保存,1 个月内使用。(4)流式洗液的配制 1xHBSS,200 ml
操作方法所属实验:肿瘤干细胞的分离纯化
活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备
活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。
操作方法所属实验:细胞表面标记的检测技术
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