简介免疫细胞是一组不均一的细胞群体。各种特定的细胞群其细胞表面表达有各自特异的表面标志分子,利用这些特异的表面标志,可以鉴定、分离和纯化相应的细胞群。随着单克隆抗体技术的诞生和免疫标记技术(特别是荧光标记技术)的发展,以及计算机科学的应用,使利用仪器的方法检测特异的细胞膜表面分子成为可能。本章介绍的荧光激活细胞分类技术就是采用单克隆抗体技术和免疫荧光标记技术,并结合光学检测和计算机分析技术而产生的鉴定和分离特定细胞亚群的技术。原理流式细胞仪(flowcytometer)是一种能够探测和计数
一、环境和液流的消毒 1、准备足量的无菌1×PBS(3L左右)和去离子水(10L左右)。PBS和去离子水可高压灭菌,sheath桶和装DI水的5L小桶依次用75% 医用酒精和无菌去离子水各涮洗三次,然后将无菌PBS和去离子水分别注入相应桶内即可。 2、房间在分选前紫外灯照射15-20分钟;用1:50新洁尔灭拖地;用75% 医用酒精擦拭工作台和收集架;用75% 医用酒精喷洒分选细胞收集区和上样区。 二、开机和管道的消毒 1、将Sheath液换为活性氯浓度为0.5% 的次氯酸钠溶液(不要
细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是caspase家族激活,磷脂酰丝氨酸外翻,这时细胞的形态已经发生了改变,可以看到细胞变小,胞核皱缩;最后是细胞内DNA断裂,形成凋亡小体。在凋亡发生的各个过程当中,都有相应的流式细胞仪的检测方法,可以采用
流式细胞仪的工作原理 流式细胞仪主要由四部分组成:流动室和液流系统,激光源和光学系统,光电管和检测系统,计算机和分析系统。四大系统共同完成信号的产生、转换和传输任务。检测时将待测细胞或微粒制成细胞悬液,进行荧光染色后加入样品管中。以一定压力将待测样品压人流动室,在高压下磷酸缓冲液(鞘液)从鞘液管喷出,鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度,这样,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形流束(鞘流),待测细胞在鞘液包绕下单行排列,依次通过检测区。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦