流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

流式细胞仪检测细胞凋亡可应用于：（1）鉴定细胞凋亡形态；（2）准确的进行凋亡细胞的计数；（3）进行特异的定性分析和定量分析。

来源：丁香实验

操作方法

PI单染色法

一、收集细胞收集细胞｛数目约（1~ 5）x106个/mL｝，500~ 1 000 r/min离心5 min，弃去培养液。二、细胞洗涤 3 ml PBS洗涤1次。三、乙醇固定离心去PBS，加入冰预冷的70%的乙醇固定，4℃，1-2小时。四、细胞重悬离心弃去固定液，3 mlPBS重悬5 min。五、细胞过滤 400目的筛网过滤1次，500-1000 r/min离心5

Heochst 33342/PI双染色法

一、细胞培养悬浮生长的细胞在培养的状态下加入Heochst 33342 ，终浓度为1 ug/ml； 37℃孵育7-10 min。二、细胞收集低温500 ~ 1 000 r/min离心5min弃去染液。三、染色加入1.0 ml PI染液，4℃避光染色15 min。四、过滤 400目的筛网过滤1次。五、流式细胞仪分析

Annexin V/PI双染色法

一、.细胞收集 1. 悬浮细胞直接收集到10 ml的离心管中，每样本细胞数为（1～5）x106/ml。 2. 500～1 000 r/min离心5 min，弃去培养液。二、细胞洗涤 1. 用孵育缓冲液洗涤1次。 2. 500～1000r/min离心5min。三、细胞标记 1. 用100 ul的标记溶液重悬细胞。 2. 室温下避光孵育10～15min。 3. 500～1 00