5.3 实验时间_流式细胞仪检测细胞凋亡实验
丁香园
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流式细胞仪检测细胞凋亡可以:
鉴定细胞凋亡形态;
可以准确的进行凋亡细胞的计数;
可以进行特异的定性分析和定量分析。
实验原理
细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这些特征性的变化,进而判断细胞凋亡的情况。
实验步骤
一、收集细胞
收集细胞{数目约(1~ 5)×106 个 / mL},500~1 000 r/min 离心 5 min,弃去培养液。
二、细胞洗涤
3 ml PBS 洗涤 1 次。
三、乙醇固定
离心去 PBS,加入冰预冷的 70% 的乙醇固定,4℃,1~2 小时。