流式细胞仪标本制备

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2023-03-23

简介

流式细胞仪标本制备可应用于：（1）诊断细胞表面标志物；（2）免疫学研究；（3）分离纯化某一群或亚群细胞。

来源：丁香实验

操作方法

荧光标记法

制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法) ↓ 用10％FCS　RPMI1640调整细胞浓度为5x106～1x107／ml ↓ 取40ul细胞悬液加入预先有特异性McAb(5～50ul)的小玻璃管或塑料离心管，再加50ul 1∶20(用DPBS 稀释)灭活正常兔血清 ↓4℃ 30min 用洗涤液洗涤2次，每次加洗涤液2ml左右1000rpmx5min ↓

流式细胞仪标本的制备的具体步骤是什么？

（1）制备活性高的单细胞悬液：用胰酶消化细胞，PBS 清洗 2-3 次，主要去除胰酶，然后使用完全培养基将细胞调整为 5×10^6-5×10^7 个 /ml 即得待检样本；（2）取 40 μl 细胞悬液加入预先有特异性 McAb（5-50 μl）的小玻璃管或塑料离心管，再加 50 μl 1:20（用 DPBS 稀释）灭活正常兔血清，置于 4℃ 30 min；（3）用洗涤液洗涤 2 次，每次加洗涤液