丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

流式细胞仪标本的制备的具体步骤是什么?

相关实验:流式细胞仪标本制备

最新修订时间:

丁香实验推荐阅读

合作专家 | 宋倩硕士

毒理学 贵州医科大学

丁香实验推荐阅读

审核专家 | 孔月硕士

生理学 大连医科大学

材料与仪器

胰蛋白酶、PBS

步骤

(1)制备活性高的单细胞悬液:用胰酶消化细胞,PBS 清洗 2-3 次,主要去除胰酶,然后使用完全培养基将细胞调整为 5×10^6-5×10^7 个 /ml 即得待检样本;

(2)取 40 μl 细胞悬液加入预先有特异性 McAb(5-50 μl)的小玻璃管或塑料离心管,再加 50 μl 1:20(用 DPBS 稀释)灭活正常兔血清,置于 4℃ 30 min;

(3)用洗涤液洗涤 2 次,每次加洗涤液 2 ml 左右,1000 rpm 离心 5 min;

(4)弃上清,加入 50 μl 工作浓度的羊(或兔)抗鼠荧光标记物,充分振摇,置于 4℃ 30 min;

(5)用洗涤液洗涤 2 次,每次加液 2 ml 左右,1000 rpm 离心 5 min;

(6)加 1 ml 固定液制成流式细胞仪标本。

来源:丁香实验

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序